HiMedia GM1379-500G SOC бульон

Питательный бульон HiMedia GM1379-500G SOC (гранулированный) предназначен для выращивания бактериальных клеток и восстановления трансформантов. Среда используется для подготовки химически компетентных клеток и повышения эффективности трансформации с итоговым значением pH 7,0 ± 0,2.

Принцип работы и интерпретация

Бульон SOC (SOC Broth) представляет собой обогащенную питательную среду, которая готовится путем добавления 20 % раствора глюкозы к среде SOB (бульон Ханахана, GM1252/M1252). Среда применяется для культивирования бактериальных клеток, подготовки химически компетентных клеток и на этапе восстановления после трансформации компетентных клеток.

Процесс подготовки включает следующие этапы:

1. Выращивание E. coli в среде SOB (GM1252/M1252) до достижения необходимой плотности клеток.
2. Сбор клеток и их подвергание химической обработке или электропорации для создания компетентных клеток.
3. Трансформация компетентных клеток подходящим методом.
4. Выращивание полученных трансформантов в среде SOC.

Использование бульона SOC позволяет максимально увеличить эффективность трансформации компетентных клеток.

Роль компонентов:

• Ферментативный гидролизат казеина и дрожжевой экстракт: служат богатыми источниками азота и факторов роста, которые легко усваиваются бактериями, находящимися в состоянии стресса после процедур трансформации, что способствует их восстановлению и активному росту.
• Хлорид калия и хлорид натрия: поддерживают изотонические условия.
• Сульфат магния: источник ионов магния, необходимых для ряда ферментативных реакций, включая репликацию ДНК.

Состав

Состав, г/л:

*Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления

1. Растворите 28,08 г среды в 980 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 20 мл стерилизованного фильтрованием 20 % раствора глюкозы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: гранулированная среда от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 7,0 ± 0,2 для 2,8 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.