Бульон ЕС HiMedia GM127-500G (уп/500 гр)

Селективная питательная среда Бульон ЕС HiMedia GM127-500G (уп/500 гр), производства HiMedia, предназначена для бродильного метода определения бактерий группы кишечной палочки. Бульон ЕС применяют для предварительного подсчёта Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды, пищевых продуктов, молока и моллюсков методом наиболее вероятных чисел (MPN); среда выпускается в гранулированной форме.

Назначение и область применения

Бульон ЕС рекомендован для селективного количественного определения предполагаемых Escherichia coli методом наиболее вероятных чисел (MPN) в пробах воды и пищевых продуктов.

Среду применяют:

• для бактериологического исследования воды, молока и пищевых продуктов;
• для определения колиформных бактерий;
• для подтверждающих исследований на Escherichia coli;
• для подсчёта Escherichia coli в морской воде и при исследовании моллюсков;
• для анализа замороженных продуктов и ядер орехов;
• для оценки качества воды, сточных вод и пищевых продуктов методом MPN;
• для выявления колиформных организмов при температуре 37 °C;
• для выделения Escherichia coli из воды и моллюсков при температуре 44,5 °C;
• для исследования пищевых продуктов на Escherichia coli при температуре 45,5 °C.

При использовании в подтверждающем тесте методика с Бульоном ЕС позволяет получить информацию о происхождении колиформной группы — фекальном или нефекальном.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация

Бульон ЕС предназначен для выявления колиформных бактерий при бактериологическом исследовании воды, молока и пищевых продуктов. Среда первоначально описана Hajna и Perry; позднее Fishbein и Surkiewicz применяли её для подтверждающих тестов на Escherichia coli. Бульон также используется в методах MPN и для подтверждения наличия колиформных бактерий.

• Триптон служит источником азотистых и углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью и других необходимых для роста питательных веществ.
• Лактоза является ферментируемым углеводом.
• Смесь желчных солей подавляет рост грамположительных бактерий, особенно бацилл и фекальных стрептококков.
• Фосфаты поддерживают значение pH в процессе ферментации лактозы.
• Образование газа в ферментационной трубке в течение 24 ч или менее является предварительным признаком присутствия колиформных бактерий.

Бульон ЕС не следует использовать для прямого выделения колиформных бактерий: для оптимального восстановления фекальных колиформ требуется предварительное обогащение в селективной предварительной среде.

Интерпретация газообразования:

• газообразование при 44,5 °C или 45,5 °C, а также при 37 °C — признак Escherichia coli и, возможно, других колиформных бактерий;
• газообразование при 37 °C — признак колиформных бактерий без Escherichia coli.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,0 г сухой гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки, содержащие перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин при давлении около 0,103 МПа (15 psi, приблизительно 1,03 бар).
5. При работе с пробами различного объёма скорректируйте концентрацию среды в соответствии с размером пробы.

Методика подтверждающего анализа

При использовании пробы объёмом более 10 мл среду необходимо восстановить в концентрации, эквивалентной концентрации, указанной в инструкции.

1. Перенесите петлёй культуру из всех пробирок с лаурилсульфатным бульоном M080, в которых в течение 24 ч образовался газ.
2. Также перенесите культуру из всех пробирок, в которых в течение 48 ч наблюдался бактериальный рост.
3. Перенесите инокулят в пробирки с Бульоном ЕС.
4. Не позднее чем через 30 мин после внесения инокулята поместите пробирки в водяную баню.
5. Инкубируйте пробирки при 44 °C в течение 24 ч.
6. Рост с образованием газа расценивайте как положительную реакцию.
7. Рассчитайте плотность фекальных колиформных организмов с использованием таблиц MPN.

Тип исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.
• Молоко и молочные продукты.
• Моллюски.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим методическим указаниям.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб с учётом действующих методических указаний и местных нормативных требований.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения и мешающие факторы

1. Для идентификации микроорганизмы должны находиться в чистой культуре.
2. Для окончательной идентификации следует выполнять морфологические, биохимические и/или серологические тесты.
3. Бульон ЕС не предназначен для прямого выделения колиформных бактерий без предварительного обогащения.
4. Ложноотрицательные реакции при восстановлении колиформных бактерий из проб воды возможны вследствие низкого значения pH, охлаждения или присутствия бактерицидных и бактериостатических веществ.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: элективная.
• Назначение изделия: бульон.
• Форма выпуска: гранулированная.
• Физическая форма: гранулы.
• Происхождение: животное.
• Конечное значение pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 3,7 % масс./об.
• Цвет сухой среды: от кремового до жёлтого.
• Внешний вид сухой среды: однородный, сыпучий гранулированный порошок.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: жёлтый прозрачный раствор без осадка.
• Тип упаковки: флакон из полиэтилена высокой плотности (HDPE).
• Масса упаковки: 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Производитель: HiMedia.

Контроль качества

Внешний вид

Сухой продукт должен представлять собой однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда должна иметь жёлтую окраску, быть прозрачной и не содержать осадка.

Реакция среды

Реакцию определяют для водного раствора концентрацией 3,7 % масс./об. при 25 °C.

• Знач