HiMedia GM1250-500G Бульон Тартоффа-Хоббса (Terrific бульон)

Гранулированная питательная среда HiMedia GM1250-500G Бульон Тартоффа—Хоббса (бульон Террифик) предназначена для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli и поставляется в упаковке 500 г. Среда поддерживает высокую клеточную плотность и длительную логарифмическую фазу роста; хранить сухую среду следует при температуре ниже 30 °C, приготовленную среду — при 2–8 °C.

Назначение

Бульон Тартоффа—Хоббса применяют для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli, получения биомассы, рекомбинантных белков и плазмидной ДНК. Среда может использоваться вместо бульона Лурия—Бертані (Luria Bertani, GM1151/M1151) для повышения выхода плазмидной ДНК и рекомбинантных белков.

Принцип действия и интерпретация

Бульон Тартоффа—Хоббса разработан для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli. При культивировании в этой среде такие штаммы имеют удлинённую фазу роста.

Бульон поддерживает высокую клеточную плотность и биомассу, а также длительное сохранение культуры в логарифмической фазе роста. Благодаря этому повышается выход рекомбинантных белков и плазмидной ДНК.

Казеиновый ферментативный гидролизат и дрожжевой экстракт обеспечивают рекомбинантные штаммы E. coli необходимыми питательными веществами и кофакторами. Повышенное содержание пептона и дрожжевого экстракта способствует увеличению выхода плазмид в расчёте на объём среды. Два фосфата обеспечивают буферное действие среды. Глицерин используется как источник углеводов; в отличие от глюкозы, глицерин не ферментируется до уксусной кислоты.

Процедуры инокуляции, инкубации и получения рекомбинантных штаммов подробно описаны в методике Sambrook и соавторов.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 47,6 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 4 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам или колбам в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов силы на кв. дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Контроль качества

Внешний вид

Гранулированная среда кремового или светло-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-янтарного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция 4,76 % (м/об.) водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Рост определяют по появлению мутности.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Сухая среда: хранить в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленная среда: хранить при 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.