Гранулированная питательная среда HiMedia GM1003-500G Лактозный бульон предназначена для выявления представителей семейства Enterobacteriaceae, включая колиформные бактерии и виды Salmonella, в воде, пищевых продуктах и молочных продуктах. Среда используется для предварительного обнаружения микроорганизмов по газообразованию при ферментации лактозы, а положительные результаты требуют дальнейшего выделения и биохимического подтверждения.

Назначение и область применения

Лактозный бульон применяют для:

• предварительного выявления колиформных бактерий в образцах воды, пищевых продуктов и молочных продуктов;
• обнаружения представителей Enterobacteriaceae, включая Salmonella;
• оценки фекального загрязнения рекреационных поверхностных вод и питьевой воды;
• проведения предварительной идентификации колиформных бактерий, Escherichia coli и фекальных колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа;
• выполнения подтверждающего и предварительного этапов анализа воды, пищевых продуктов и молока;
• исследования молочных продуктов на этапе завершённого теста.

Лактозный бульон рекомендован APHA для предварительного и подтверждающего тестирования на колиформные бактерии в воде, пищевых продуктах и молоке. Среда также применяется в соответствии с методикой FDA BAM для предварительной идентификации колиформных бактерий, E. coli и фекальных колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа.

Среда первоначально была включена как альтернатива лаурилсульфатному бульону при предварительном стандартном многопробирочном тесте на общее содержание колиформных бактерий в воде. Хотя состав среды не является исходной формулой для этого метода, лактозный бульон обеспечивает определение газообразования в тестах Эйкмана при 45 °C, что является характеристикой Escherichia coli.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности. HM Peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация результатов

Пептон и HM Peptone B поставляют микроорганизмам азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые питательные вещества. Лактоза служит сбраживаемым углеводом для колиформных бактерий.

Пробирки с лактозным бульоном инокулируют разведениями исследуемой воды, молока или другого образца и инкубируют при 35 °C. Формирование газа оценивают через 24 и 48 ч. К колиформной группе относят аэробные и факультативно-анаэробные неспорообразующие грамотрицательные палочки, ферментирующие лактозу с образованием газа в течение 48 ч при 35 °C.

Обнаружение колиформных бактерий в питьевой воде, заявленной как прошедшая обработку для обеспечения безопасности, указывает на недостаточность или нарушение процесса обработки. Наличие таких микроорганизмов используют как бактериологический показатель степени фекального загрязнения питьевой воды и рекреационных поверхностных вод.

При исследовании больших объёмов воды может потребоваться лактозный бульон двойной концентрации для минимизации конечного разбавления среды инокулятом.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Молочные продукты.
• Вода.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 13,0 г гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды. Следует избегать перегрева.
3. При использовании больших объёмов инокулята — 10 мл и более — допускается приготовление концентрированной среды для компенсации разбавления среды инокулятом.
4. Разлейте приготовленную среду по пробиркам с перевёрнутыми газовыми ловушками Дюргема в необходимом количестве.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Приготовленную среду необходимо распределять по пробиркам до стерилизации. Для определения газообразования пробирки инокулируют соответствующими разведениями исследуемого образца и инкубируют при 35 °C, оценивая результат через 24 и 48 ч.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным методическим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб с учётом действующих методических руководств и местных нормативных требований.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид среды: гранулы от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло- или средне-янтарного цвета, без осадка.

Реакция среды

Реакция 1,3 % водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее название Enterobacter aerogenes.

^ Ранее название Pseudomonas aeruginosa.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при температуре 15–30 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия храните среду в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования вследствие гигроскопичности продукта. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее выделение микроорганизмов и биохимические тесты.

Оценка эффективности

Эффективность среды ожидается при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующ