Бульон HiEncap™ Luria-основа, Miller's модификация HiMedia EC1725CCL-75NO (75 шт.)

Сухая питательная среда «Бульон HiEncap™ Luria-основа, Miller's модификация HiMedia EC1725CCL-75NO (75 шт.)» производства HiMedia выпускается в капсулах: одна капсула содержит 3,88 г среды для приготовления 250 мл. Среда предназначена для культивирования и поддержания рекомбинантных штаммов Escherichia coli с добавлением глюкозы или без неё.

Назначение и принцип действия

Среда на основе формулы бульона Лурия, описанной Миллером, предназначена для выращивания чистых культур рекомбинантных штаммов E. coli, применяемых в молекулярной биологии. В поздней логарифмической фазе роста бактерии культивируют в среде LB. Некоторые плазмидные векторы способны реплицироваться до высокой копийности без селективной амплификации; для векторов с менее свободной репликацией может потребоваться селективная амплификация. Для подавления синтеза компонентов клетки-хозяина и предотвращения репликации бактериальной хромосомы можно добавлять хлорамфеникол.

Содержание хлорида натрия в модификации Миллера составляет одну десятую и одну двадцатую от его содержания соответственно в вариантах LB-агара Леннокса и Миллера. Это позволяет выбирать концентрацию соли, подходящую для конкретного штамма. При необходимости в среду асептически добавляют глюкозу.

Триптон служит источником пептидов и пептонов, дрожжевой экстракт — витаминов группы B. Хлорид натрия обеспечивает ионами натрия мембранный транспорт и поддерживает осмотическое равновесие среды.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизована по параметрам эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте одну капсулу в 250 мл дистиллированной или очищенной воды либо четыре капсулы в 1000 мл воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; указанное давление — 15 фунтов, что соответствует примерно 0,10 МПа.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 20 % об./об. раствора глюкозы: 2,5 мл на 250 мл среды или 10 мл на 1000 мл.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки или колбы.

Образцы и обращение с ними

Тип образца: рекомбинантные штаммы E. coli.

При работе с образцами соблюдайте установленные правила обращения с рекомбинантными штаммами и стандартные практики микробиологической лаборатории. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: желатиновая капсула с гранулированной средой кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор от жёлтого до янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Количество: 3,88 г среды в капсуле, достаточно для приготовления 250 мл среды.

Реакция: для водного раствора концентрацией 1,55 % масс./об. при 25 °C pH составляет 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Эффективность среды ожидается при приготовлении согласно инструкции на этикетке, соблюдении рекомендованной температуры хранения и использовании до истечения срока годности.

Ограничения применения

• Из-за различий в пищевых потребностях отдельные штаммы могут расти слабо.
• Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. Соблюдайте надлежащие микробиологические практики и стандартные меры предосторожности при обращении с образцами и культурами. Дополнительные указания по безопасности приведены в паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Сухая среда: хранить при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленная среда: хранить при 15–25 °C.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде; плотно закрывать контейнер, чтобы из-за гигроскопичности среды не образовывались комки.
• Хранить в сухом проветриваемом месте, защищённом от резких перепадов температуры и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Использовать до срока годности, указанного на этикетке. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте установленные лабораторные процедуры для инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с образцами, следует обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики