Бульон HiEncap™ SOC-основа HiMedia EC1379CCL-50NO (50 шт.)

Сухая питательная среда — Бульон HiEncap™ SOC-основа HiMedia EC1379CCL-50NO (50 шт.) в желатиновых капсулах, одна капсула рассчитана на приготовление 250 мл среды. Предназначен для молекулярной биологии, в том числе для восстановления трансформированных компетентных бактериальных клеток; среда общего назначения может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение и принцип действия

SOC-бульон применяют для культивирования бактериальных клеток, получения химически компетентных клеток и восстановления компетентных клеток после трансформации. Среду готовят добавлением 20%-го раствора глюкозы к SOB-среде (бульону Ханахана) M1252.

Для получения компетентных клеток Escherichia coli сначала выращивают в SOB-среде до требуемой плотности клеток, затем клетки собирают и подвергают химической обработке или электропорации. После трансформации подходящим методом трансформанты выращивают в SOC-среде.

Триптон и дрожжевой экстракт служат источниками азота и факторов роста, доступных бактериям, испытывающим стресс после процедур трансформации, и способствуют восстановлению и росту клеток. Хлорид калия и хлорид натрия поддерживают изотонические условия. Сульфат магния служит источником ионов магния, необходимых для различных ферментативных реакций, в том числе репликации ДНК. Использование SOC-бульона способствует повышению эффективности трансформации компетентных клеток.

Состав

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 1 капсулу в 250 мл дистиллированной или очищенной воды либо 4 капсулы в 1000 мл воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 psi (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C и асептически добавьте 20%-й раствор глюкозы: 5 мл на 250 мл среды или 20 мл на 1000 мл среды.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки или колбы.

Образцы и обращение с ними

Тип образца: выделенная рекомбинантная культура Escherichia coli.

При работе с образцами выделенных микроорганизмов соблюдайте установленные правила обращения с биологическими материалами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: желатиновая капсула с гранулированной средой кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета без осадка в пробирках.

Количество: одна капсула содержит 7,02 г среды, достаточные для приготовления 250 мл.

Реакция: для 2,8%-го водного раствора при 25 °C — pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Эффективность среды ожидается при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Ограничения применения

• Среда общего назначения может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
• Для дальнейшей идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Безопасность

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. Используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности. Дополнительные требования безопасности приведены в паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

Храните закрытый контейнер при температуре 10–30 °C. Приготовленную среду храните при 15–25 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия храните продукт в сухом виде и плотно закрывайте контейнер, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности среды. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания. После использования плотно закрывайте контейнер.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо обезвредить автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте установленные лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными правилами.

Технические характеристики