Пластинка HiDip с лактозо-цистин.агар. и агар.МакКонки с МУГ HiMedia HD005-10TB (10 шт.)

Пластинка HiDip с лактозо-цистин.агар. и агар.МакКонки с МУГ HiMedia HD005-10TB (10 шт.) — тест-система с двумя агаровыми средами на гибкой пластиковой основе для прямого определения и идентификации Escherichia coli при УФ-освещении с длиной волны 366 нм. Пластинка применяется для анализа поверхностей, жидкостей, мочи, пищевых и молочных продуктов, воды; основа разделена на 10 зон площадью по 1 см² для расчёта микробной контаминации на единицу площади.

Назначение

Пластинка предназначена для прямого определения и идентификации Escherichia coli под длинноволновым ультрафиолетовым светом с длиной волны 366 нм.

Области применения:

• клинические образцы: моча;
• пищевые и молочные продукты;
• вода;
• контроль микробной контаминации поверхностей;
• количественная оценка степени обсеменённости поверхности по числу колоний на единицу площади.

Конструкция и принцип применения

HiDip Slides состоят из гибкой пластиковой основы, на отдельных поверхностях которой размещены две стерильные агаровые среды:

• агар C.L.E.D. с бромтимоловым синим, также описываемый как лактозо-цистиновый агар;
• агар МакКонки с МУГ.

Выступающая поверхность агара и гибкое соединение пластинки в зоне шарнира позволяют выполнять отпечатки с исследуемых поверхностей. Основа разделена на 10 зон площадью по 1 см² каждая, что позволяет рассчитывать микробную контаминацию поверхности на единицу площади.

Агар C.L.E.D. применяют для выделения, количественного учёта и идентификации возбудителей инфекций мочевыводящих путей по способности ферментировать лактозу.

Агар МакКонки с МУГ применяют для селективного выделения и выявления лактозоферментирующих колиформных микроорганизмов флуорогенным методом. Среда выявляет фермент β-глюкуронидазу, что позволяет быстро идентифицировать Escherichia coli в смешанных клинических образцах. Фермент расщепляет МУГ с образованием 4-метилумбеллиферона, который под воздействием длинноволнового ультрафиолетового света создаёт видимую зеленовато-голубую флуоресценцию. Индикаторы роста облегчают наблюдение и количественный учёт колоний.

Состав сред

Агар C.L.E.D. с бромтимоловым синим

Состав приведён в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Агар МакКонки с МУГ

Состав приведён в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика работы с образцами

Отпечаток с поверхности

1. Ослабьте крышку контейнера и извлеките пластинку HiDip, не касаясь поверхностей агара.
2. Проверьте пластинку на отсутствие обезвоживания и загрязнения.
3. Осторожно опустите пластинку и прижмите агар к исследуемой поверхности, сгибая пластинку по линии шарнира.
4. Прикладывайте равномерное усилие в течение 15–20 с.
5. Не допускайте размазывания агара по исследуемой поверхности.
6. Повторите процедуру со второй агаровой поверхностью на участке, расположенном рядом с первым местом отбора.
7. Верните пластинку в контейнер и плотно закройте его.
8. Инкубируйте контейнер в вертикальном положении при заданной температуре.

Анализ жидкостей

1. Ослабьте крышку контейнера и извлеките пластинку HiDip.
2. Проверьте пластинку на отсутствие обезвоживания и загрязнения.
3. Погрузите пластинку в исследуемую жидкость на срок до 15–20 с, чтобы поверхность агара была полностью покрыта образцом.
4. При недостаточном объёме жидкости налейте образец непосредственно на поверхность пластинки.
5. Дайте излишку жидкости стечь.
6. Осторожно постучите по пластинке, чтобы удалить излишек жидкости с поверхности.
7. Верните пластинку в контейнер и плотно закройте его.
8. Инкубируйте контейнер в вертикальном положении при заданной температуре.
9. Для последующей идентификации промаркируйте контейнер, указав номер образца, источник, дату, время и другие необходимые сведения.

Интерпретация результатов

Агар C.L.E.D.

Незасеянная среда имеет зелёно-голубой цвет. При инкубировании в течение 18–24 ч при 35–37 °C наблюдаются следующие признаки:

• Escherichia coli образует жёлтые непрозрачные колонии с интенсивно окрашенным центром;
• Klebsiella образует жёлтые или голубоватые колонии;
• Proteus образует голубые колонии;
• Salmonella образует голубоватые колонии;
• стафилококки образуют тёмно-жёлтые колонии;
• энтерококки образуют желтоватые или зеленоватые колонии.

Агар МакКонки с МУГ

Незасеянная среда имеет красный цвет с лиловым оттенком. Колиформные бактерии образуют розовые или красные колонии; вокруг колоний Escherichia coli может выпадать преципитат. Ростовые характеристики определяют после инкубирования пластинок в течение 18–24 ч при 35–37 °C.

Флуоресценцию колоний оценивают под длинноволновым ультрафиолетовым светом с длиной волны 366 нм. Положительная флуоресценция указывает на образование 4-метилумбеллиферона при расщеплении МУГ ферментом β-глюкуронидазой.

Типы образцов

• Моча.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.
• Отпечатки с исследуемых поверхностей.

Пробоотбор и обращение с образцами

Пробоотбор и обращение с образцами выполняют в соответствии с процедурами, приведёнными в разделе «Методика работы с образцами».

Для анализа мочи среду рекомендуется инокулировать непосредственно после сбора образца.

Ограничения применения

Агар C.L.E.D.

• Среда рекомендована для исследования инфекций мочевыводящих путей.
• Низкое количество микроорганизмов в моче может быть связано с антибиотикотерапией или низким значением pH мочи.
• Выделение микроорганизмов зависит от их количества в моче.
• Среду необходимо инокулировать сразу после сбора мочи.

Агар МакКонки

Для усиления флуоресценции пластины подвергают воздействию паров аммиака в соответствии с рекомендацией Freir и Hartman.

Контроль качества

Внешний вид

Пластинка HiDip содержит комбинацию стерильного агара C.L.E.D. и агара МакКонки с МУГ, размещённых на отдельных поверхностях.

Цвет

• Цвет агара C.L.E.D.: зелёный гель.
• Цвет агара МакКонки с МУГ: красный гель с лиловым оттенком.

Количество среды

Количество среды: 2,5 мл на каждую поверхность.

Стерильность и pH

• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.
• Диапазон pH агара C.L.E.D.: 7,10–7,50.
• Диапазон pH агара МакКонки с МУГ: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Агар C.L.E.D.

| Организм