GSEM добавка, 50X жидкий HiMedia TCL088-100ML (100 мл)

Жидкая добавка GSEM добавка, 50X жидкий HiMedia TCL088-100ML (100 мл) производства HiMedia — стерильно фильтрованный концентрат 50× для среды экспрессии глутаминсинтетазы. Добавка применяется для поддержки роста и селекции трансфицированных клеток в среде с дефицитом глутамина; для отбора трансфицированных клеток CHO используют ингибитор метионинсульфоксимин (MSX).

Назначение и принцип применения

Среда экспрессии глутаминсинтетазы (GSEM) с добавкой поддерживает рост трансфицированных клеток, содержащих ген фермента глутаминсинтетазы (GS).

L-глутамин — необходимая для клеток аминокислота и источник азота для синтеза других аминокислот и нуклеотидов пуринового ряда. При недостатке глюкозы он также может служить источником энергии. В среде с дефицитом глутамина для биосинтеза глутамина из глутамата и аммиака клеткам необходимы фермент GS и добавка GSEM.

Селекция клеточных линий

Некоторые клеточные линии, например клетки мышиной миеломы NS0, не экспрессируют GS. В среде с дефицитом глутамина такие клетки выживают только после трансфекции геном GS.

Другие клеточные линии, например CHO, экспрессируют достаточно GS, чтобы выживать в среде с дефицитом глутамина. При работе с трансфицированными клетками CHO применяют ингибитор GS — метионинсульфоксимин (MSX). Он подавляет активность эндогенной GS, благодаря чему выживают только трансфектанты с дополнительной активностью GS.

Ген целевого продукта встраивают в экспрессионный вектор, который также содержит ген GS. В присутствии добавки GSEM и при выращивании в среде с дефицитом глутамина выживают только клетки с геном GS и, следовательно, геном целевого продукта. Трансфицированные клетки CHO выращивают в среде с дефицитом глутамина, содержащей MSX. Систему применяют для получения высокопродуктивных клеточных линий за сокращённое время. Линии NS0 и CHO широко используют в промышленном производстве антител.

Технические характеристики

• Тип: стерильно фильтрованная жидкая добавка к среде экспрессии глутаминсинтетазы (GSEM)
• Концентрация: 50×
• Объём: 100 мл
• Производитель: HiMedia