HiMedia SL202-25SL Среда агара Миддлбрук 7H10

Питательная среда HiMedia SL202-25SL Среда агара Миддлбрук 7H10 — агаровая среда на скошенной основе для выделения, культивирования и определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis. Применяется для исследования клинических образцов мокроты и чистых культур микобактерий при инкубации при 30–35 °C в атмосфере с 5–10 % CO₂; среду необходимо хранить в темноте при 2–8 °C.

Назначение

Среда предназначена для выделения, культивирования и определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis. Для посева используют предварительно деконтаминированные и концентрированные образцы мокроты либо чистые культуры микобактерий, выделенные из клинического образца.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных показателей эффективности среды.

Методика применения

1. Инокулируйте поверхность скошенной среды одним из следующих типов материала:
   • образцом мокроты, предварительно подвергнутым деконтаминации и концентрированию;
   • чистой культурой микобактерий, выделенной из клинического образца.
2. Инкубируйте пробирки со скошенной средой при 30–35 °C в атмосфере, содержащей 5–10 % CO₂.
3. Осматривайте пробирки еженедельно в течение периода до 8 недель.

Принцип действия и интерпретация

В составах Dubos и Middlebrook используются олеиновая кислота и альбумин. Эти компоненты защищают микобактерии от токсичных веществ и способствуют росту туберкулёзных бацилл.

Агаровая основа Middlebrook 7H10 разработана на основе состава Middlebrook. Cohn и соавторы модифицировали исходную олеиново-альбуминовую агаровую среду и наблюдали быстрый обильный рост видов Mycobacterium, обозначив разработанную среду как 7H10.

Агар Middlebrook 7H10 также применяется для выделения, культивирования и определения чувствительности M. tuberculosis после обогащения добавкой OADC для стимуляции роста (FD018) и глицерином.

Механизмы действия компонентов:

• неорганические соли поддерживают рост микобактерий;
• лимонная кислота, образующаяся из цитрата натрия, способствует удержанию неорганических катионов в растворе;
• глицерин служит источником углерода и энергии;
• добавка Middlebrook OADC для стимуляции роста (FD018) содержит олеиновую кислоту, бычий альбумин, хлорид натрия, декстрозу и каталазу;
• олеиновая кислота и другие длинноцепочечные жирные кислоты необходимы для метаболизма микобактерий;
• некоторые свободные жирные кислоты токсичны для микобактерий, однако альбумин связывает эти жирные кислоты и предотвращает их токсическое действие;
• декстроза служит источником энергии;
• каталаза нейтрализует токсичные пероксиды;
• малахитовый зелёный частично подавляет рост других бактерий.

Микобактерии являются строгими аэробами, поэтому во время инкубации необходимо обеспечивать повышенное парциальное давление CO₂ и аэробные условия. При деконтаминации образца требуется соблюдать осторожность. Необходимо использовать правильно собранный клинический материал — мокроту, а не слюну. Образцы следует обрабатывать с соблюдением мер, предотвращающих контаминацию.

Тип образца

Тип клинического образца: мокрота.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предупреждения и предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Храните среду в темноте до и после инокуляции.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная агаровая среда Middlebrook 7H10 на скошенной поверхности в стеклянной пробирке.

Цвет

Среда светло-жёлтого цвета.

Объём среды

8 мл среды в стеклянной пробирке.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают через 7 суток при 35–37 °C при использовании скошенной агаровой среды Middlebrook 7H10.

Хранение и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительный контекст

Для агара Middlebrook 7H10 в описании методики отмечено меньшее загрязнение по сравнению с яичными средами, обычно применяемыми для культивирования микобактерий.