HiMedia SL202-10SL Среда агара Миддлбрук 7H10

Питательная среда HiMedia SL202-10SL Среда агара Миддлбрук 7H10 — готовый скошенный агар в стеклянной пробирке объёмом 8 мл для выделения, культивирования и определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis. Среда предназначена для исследования клинических образцов мокроты и чистых культур микобактерий с инкубацией при 30–35 °C, 5–10 % CO₂ в течение до 8 недель.

Назначение

Среда рекомендована для выделения, культивирования и определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis. Используется с образцами мокроты после деконтаминации и концентрирования либо с чистой культурой микобактерий, выделенной из клинического образца.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика применения

1. Нанесите на поверхность скошенной среды образец мокроты, предварительно подвергнутый деконтаминации и концентрированию, либо чистую культуру микобактерий, выделенную из клинического образца.
2. Инкубируйте пробирки со скошенной средой при 30–35 °C в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 %.
3. Осматривайте пробирки еженедельно в течение периода до 8 недель.

Принцип действия и интерпретация

Дюбос и Миддлбрук разработали составы, содержащие олеиновую кислоту и альбумин. Эти компоненты защищают микобактерии от токсичных веществ и способствуют росту туберкулёзных палочек.

Основа агара Миддлбрука 7H10 была разработана на основе состава Миддлбрука. Коун и соавторы модифицировали исходный олеиново-альбуминовый агар и наблюдали быстрый обильный рост видов Mycobacterium, которому присвоили обозначение 7H10.

Кубика и Дай сообщили о меньшем уровне контаминации на агаре 7H10 по сравнению с яичными средами, обычно применяемыми для культивирования микобактерий.

Основа агара Миддлбрука 7H10 также используется для выделения, культивирования и определения чувствительности M. tuberculosis после обогащения добавкой для роста Миддлбрука OADC (FD018) и глицерином.

Среды Миддлбрука содержат неорганические соли, способствующие росту микобактерий. Лимонная кислота, образующаяся из цитрата натрия, удерживает неорганические катионы в растворе. Глицерин является источником углерода и энергии.

Добавка для роста Миддлбрука OADC (FD018) содержит олеиновую кислоту, альбумин бычьего происхождения, хлорид натрия, декстрозу и каталазу. Олеиновая кислота и другие длинноцепочечные жирные кислоты необходимы для метаболизма микобактерий. Некоторые свободные жирные кислоты токсичны для микобактерий, однако альбумин связывает эти жирные кислоты и предотвращает их токсическое действие. Декстроза служит источником энергии. Каталаза нейтрализует токсичные пероксиды. Малахитовый зелёный частично подавляет рост других бактерий.

Микобактерии являются строгими аэробами, поэтому во время инкубации необходимо обеспечивать повышенное парциальное давление CO₂ и аэробные условия. Особое внимание следует уделять деконтаминации образца. Необходимо правильно собирать образцы: требуется мокрота, а не слюна. Образцы следует обрабатывать с соблюдением мер, предотвращающих контаминацию.

Тип образца

Клинический образец: мокрота.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среду необходимо хранить в темноте до и после инокуляции.

Технические характеристики

• Тип изделия: питательная среда
• Форма выпуска: скошенный агар в стеклянной пробирке
• Объём среды: 8 мл в стеклянной пробирке
• Цвет среды: светло-жёлтый
• Стерильность: соответствует критериям выпуска
• Рабочий диапазон температуры инкубации: 30–35 °C
• Содержание CO₂ при инкубации: 5–10 %
• Период наблюдения культур: до 8 недель
• Условия хранения при получении: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный скошенный агар Миддлбрука 7H10 в стеклянной пробирке.

Цвет

Среда светло-жёлтого цвета.

Количество среды

8 мл среды в стеклянной пробирке.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют через период до 7 суток при 35–37 °C при использовании скошенного агара Миддлбрука 7H10.

Хранение и срок годности

При получении хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническим образцом, следует обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный технический контекст

В отличие от яичных сред, применяемых для культивирования микобактерий, агар Миддлбрука 7H10 основан на олеиново-альбуминовой системе и, согласно приведённым данным, обеспечивает меньшую контаминацию; для полноценного применения при выделении, культивировании и определении чувствительности M. tuberculosis используется обогащение добавкой OADC (FD018) и глицерином.