HiMedia SL184T-25SL Среда желчно-эскулинового агара в пробирках

Питательная среда HiMedia SL184T-25SL Среда желчно-эскулинового агара в пробирках — стерильный желчно-эскулиновый агар на скошенной поверхности с содержанием желчи 40,000 г/л. Среда предназначена для дифференциального выделения и предположительной идентификации стрептококков группы D в пищевых и фармацевтических продуктах при инкубации 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциального выделения и предположительной идентификации стрептококков группы D в пищевых и фармацевтических продуктах.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эксплуатационных характеристик.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Желчь эквивалентна оксгаллу.

Методика применения

1. Асептически нанесите исследуемый посевной материал штрихом на скошенную поверхность среды.
2. Инкубируйте пробирки со скошенной средой при подходящих условиях.
3. Рекомендуемый режим инкубации: 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Для усиления роста энтерококков среду можно дополнить лошадиной сывороткой в концентрации 50 мл/л.

Исследуемую пробу следует засеять и инкубировать в бульоне Тодда—Хьюитта (M313). После 24 ч инкубации внесите две капли культуры на поверхность скошенной среды или чашечной среды.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки группы D имеют в составе клеточной стенки антиген липотейхоевой кислоты группы D. Бывшие виды группы D, являющиеся преимущественными представителями нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта человека, называются фекальными стрептококками или энтерококками (8).

Уникальная способность энтерококков расщеплять эскулин была описана Meyer и Schonfeld (10). Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием коричневато-чёрного осадка (9). Применение гидролиза эскулина для идентификации энтерококков впервые описал Rochaix (12).

Желчно-эскулиновый агар первоначально был разработан Swan (4) для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Facklam и Moody (2, 5) дополнительно показали, что желчно-эскулиновый агар позволяет дифференцировать стрептококки группы D и стрептококки, не относящиеся к группе D.

Желчно-эскулиновый агар также используют для дифференциации представителей семейств Enterobacteriaceae, родов Klebsiella, Enterobacter и Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae на основании гидролиза эскулина (11). Для идентификации энтерококков необходимо дополнительно выполнять другие тесты, например тест на устойчивость к соли (3).

Среда содержит питательные компоненты в высокой концентрации. Пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и необходимых для роста питательных веществ. Желчь подавляет большинство сопутствующих бактерий.

Эскулин в составе среды гидролизуется до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, который визуализируется в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

При разливе среды в пробирки на скошенную поверхность положительная реакция определяется по почернению более половины скошенной поверхности в течение 24–48 ч. Если почернение полностью отсутствует или в течение 24–48 ч почернело менее половины скошенной поверхности, результат теста считается отрицательным.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабую положительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный результат желчно-эскулинового теста (6).

Тип исследуемого материала

Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам (1, 13, 14).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный желчно-эскулиновый агар на скошенной поверхности в пробирках.

Цвет среды

Среда янтарного цвета с голубоватым оттенком.

Объём среды

4 мл среды в стеклянной пробирке.

Реакция

pH 6,40–6,80.

Тест на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

При получении хранить при температуре 2–8 °C.

Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.

При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо выполнять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Положительная реакция не является достаточной для окончательной идентификации энтерококков; необходимо выполнять дополнительные тесты, включая тест на устойчивость к соли.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов продукта посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.