HiMedia SL184T-10SL Среда желчно-эскулинового агара в пробирках

Питательная дифференциальная среда HiMedia SL184T-10SL Среда желчно-эскулинового агара в пробирках с 4 мл среды в стеклянной пробирке. Предназначена для дифференциального выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D в пищевых и фармацевтических продуктах; среда общего назначения может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциального выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D в пищевых и фармацевтических продуктах.

Тип исследуемого образца

• Пищевые образцы

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

HM-пептон B является эквивалентом мясного экстракта. Желчь является эквивалентом бычьей желчи (Oxgall).

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите исследуемый посевной материал штрихом на скошенную поверхность среды.
2. Инкубируйте пробирки со скошенной средой при температуре 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стрептококки группы D имеют в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Виды, ранее относимые к группе D и являющиеся преимущественными представителями нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта человека, называют фекальными стрептококками или энтерококками (8).

Уникальная способность энтерококков расщеплять эскулин была описана Meyer и Schonfeld (10). Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин до эскулетина и декстрозы; эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием коричневато-чёрного осадка (9). Применение гидролиза эскулина для идентификации энтерококков впервые описал Rochaix (12). Желчно-эскулиновый агар первоначально разработан Swan (4) для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Facklam и Moody (2, 5) дополнительно показали, что желчно-эскулиновый агар позволяет отличать стрептококки группы D от стрептококков, не относящихся к группе D.

Желчно-эскулиновый агар также способствует дифференциации представителей семейств Enterobacteriaceae, родов Klebsiella, Enterobacter и Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae на основании гидролиза эскулина (11). Для идентификации энтерококков следует выполнять дополнительные тесты, например тест на устойчивость к соли (3).

Среда обладает высокой питательностью. Пептон и HM-пептон B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и других необходимых для роста питательных веществ. Желчь подавляет большинство сопутствующих бактерий. Эскулин в составе среды гидролизуется до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, который визуализируется в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

При разливе среды в пробирки в виде скошенной поверхности положительная реакция определяется по почернению более половины скоса в течение 24–48 ч. Если почернение полностью отсутствует или в течение 24–48 ч почернело менее половины скоса, результат считают отрицательным.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию. Виды родов Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный результат желчно-эскулинового теста (6).

Для усиления роста энтерококков желчно-эскулиновый агар можно дополнить лошадиной сывороткой в концентрации 50 мл/л. Исследуемый образец инокулируют и инкубируют в бульоне Тодда—Хьюитта (M313). После 24 ч инкубации две капли культуры наносят на поверхность скошенной среды или чашки со средой (3, 9).

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам (1, 13, 14).

После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

• Стерильная желчно-эскулиновая агаровая среда со скошенной поверхностью в пробирках.

Цвет среды

• Среда янтарного цвета с голубоватым оттенком.

Количество среды

• Объём среды: 4 мл в стеклянной пробирке.

Реакция

• pH: 6,40–6,80.

Испытание на стерильность

• Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

| Организм | Посевная