HiMedia SL179-50NO Косяки L.J. для вакцин БЦЖ (50 шт.)

Питательная среда HiMedia SL179-50NO Косяки L.J. для вакцин БЦЖ (50 шт.) предназначена для количественного определения вакцины БЦЖ на скошенной среде Левенштейна—Йенсена с инкубацией при 35–37 °C. Среда применяется для выделения и культивирования микобактерий из клинических образцов и чистых культур, но может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Среда HiMedia SL179-50NO рекомендована для количественного определения вакцин БЦЖ в соответствии с главой 2.2.5 Индийской фармакопеи (IP).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Методика применения

1. На поверхность скошенной среды инокулируйте либо образец мокроты, предварительно подвергнутый деконтаминации и концентрированию, либо чистую культуру микобактерий, выделенную из клинического образца.
2. Инкубируйте скошенные среды при 35–37 °C в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 %.
3. Осматривайте скошенные среды еженедельно в течение 8 недель.

Принцип действия и интерпретация

Твёрдые среды, используемые для выделения и культивирования микобактерий, изготавливают на яичной или агаровой основе. Яичные среды содержат цельные яйца или яичный желток, картофельную муку, соли и глицерин; отверждение среды выполняется методом уплотнения нагреванием.

Наиболее распространённой яичной средой является среда Левенштейна—Йенсена. Первоначальная рецептура Левенштейна содержала конго красный и малахитовый зелёный. Йенсен модифицировал среду Левенштейна, изменив содержание цитрата и фосфата, исключив конго красный и увеличив концентрацию малахитового зелёного. Груфт дополнительно модифицировал среду, добавив два противомикробных вещества для повышения селективности.

Среда поддерживает рост широкого спектра микобактерий и также может использоваться для проведения теста на ниацин. Пенициллин и налидиксовая кислота совместно с малахитовым зелёным подавляют рост большинства контаминирующих микроорганизмов, сохранившихся после деконтаминации образца, при этом обеспечивая наиболее ранний возможный рост микобактерий. Рибонуклеиновая кислота действует как стимулятор и способствует повышению частоты выделения микобактерий.

Глицерин не следует добавлять в среду при культивировании бычьих или других глицерофобных штаммов. Малахитовый зелёный выполняет функцию ингибитора и индикатора pH. Образование синих зон указывает на снижение pH под действием грамположительных контаминантов, например стрептококков; образование жёлтых зон указывает на разрушение красителя грамотрицательными палочками. Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное разрушение среды.

Для каждого образца Харди и соавторы рекомендовали выполнять инокуляцию и инкубацию в трёх повторностях:

1. Для выявления сапрофитов — при комнатной температуре 25 °C.
2. Для определения наличия или отсутствия пигментации фотоchromогенных и скотохромогенных микобактерий — при 35 °C с попеременной экспозицией на свету и в темноте в зависимости от типа микроорганизма.

В штатной процедуре культивирование проводят аэробно при 35 °C.

Тип образца

Клинический образец: мокрота.

Сбор и обработка образцов

Для клинических образцов следует использовать соответствующие нормативные и методические источники по стандартным процедурам деконтаминации и выделения микобактерий.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
2. На среде могут расти некоторые грамположительные контаминанты, например стрептококки, и грамотрицательные палочки.
3. На среде могут расти некоторые сапрофиты.
4. Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное разрушение среды.

Ожидаемые характеристики

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Среда Левенштейна—Йенсена представляет собой смесь стерильной базовой среды — 37,24 г в 600 мл дистиллированной воды — и 1000 мл эмульсии цельного яйца от яиц, свободных от специфических патогенов (SPF). После уплотнения нагреванием смесь коагулирует с образованием непрозрачной гладкой скошенной поверхности бледного голубовато-зелёного цвета.

Культуральные характеристики

Определение числа колониеобразующих единиц (КОЕ) вакцины БЦЖ на среде SL179 проводят в соответствии с Индийской фармакопеей (IP).

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Результаты

После инкубации при 37 °C в течение 5 недель 0,1 мл восстановленной вакцины должно содержать от 1 × 10⁵ до 3,3 × 10⁵ КОЕ.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.