HiMedia SL179-50NO Косяки L.J. для вакцин БЦЖ (50 шт.)

Питательная среда HiMedia SL179-50NO (косяки L.J. для вакцин БЦЖ) предназначена для количественного определения единиц колониеобразующих единиц (КОЕ) в вакцинах БЦЖ согласно Индийской фармакопее (IP). Поставляется в виде готовых скошенных агаров (косяков) в количестве 50 шт.

Принцип работы и интерпретация

Среда основана на модификации среды Левенштейна-Йенсена (L.J.), которая представляет собой яичную среду, сгущенную путем инсписсации (нагревания). В состав входят цельные яйца или яичный желток, картофельная мука, соли и глицерин.

Для повышения селективности в среду добавлены два антимикробных компонента и малахитовый зеленый, которые подавляют рост большинства контаминантов, выживших после деконтаминации образца, стимулируя при этом максимально ранний рост микобактерий. Рибонуклеиновая кислота (РНК) выступает в роли стимулятора, увеличивая скорость изоляции микобактерий.

Малахитовый зеленый служит одновременно ингибитором и pH-индикатором:

• Образование синих зон указывает на снижение pH из-за роста грамположительных контаминантов (например, стрептококков).
• Желтые зоны свидетельствуют о разрушении красителя грамотрицательными бациллами.
• Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное переваривание среды.

Методика проведения анализа

Подготовка и посев

1. На поверхность скоса (косяка) наносят либо образец мокроты, прошедший процедуру деконтаминации и концентрирования, либо чистую культуру микобактерий, выделенную из клинического образца.
2. Инкубируют скосы при температуре 35–37 °C в атмосфере с содержанием 5–10 % CO₂.
3. Осматривают среду еженедельно в течение периода до 8 недель.

Особенности инкубации

Для идентификации сапрофитов и определения пигментации рекомендуется использовать следующие режимы:

• При 25 °C (комнатная температура) — для выявления сапрофитов.
• При 35 °C с чередованием освещения и темноты — для идентификации фотохромогенных и скотохромогенных форм.
• Стандартное культивирование проводится в аэробных условиях при 35 °C.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Контроль качества и результаты

• Внешний вид: после инсписсации среда представляет собой бледно-голубовато-зеленый, непрозрачный, гладкий скос.
• Стерильность: проходит критерии контроля на отсутствие контаминации.
• Ожидаемый результат: 0,1 мл реконструированной вакцины должен содержать от $1 \cdot 10^5$ до $33 \cdot 10^5$ КОЕ после инкубации при 37 °C в течение 5 недель.

Область применения и ограничения

Тип образцов

• Клинические образцы: мокрота.

Ограничения

• Среда общего назначения и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) организмов.
• Допускается рост некоторых грамположительных контаминантов (например, стрептококков) и грамотрицательных бацилл.
• Возможен рост некоторых сапрофитов.
• Протеолитические микроорганизмы могут вызвать частичное или полное расщепление среды.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: при получении и далее хранить при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Меры предосторожности: только для диагностики in vitro и профессионального использования. При работе с образцами использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.