HiMedia SL177-KT Модифицированный набор первой линии для туберкулеза (1 набор)

Модифицированный набор первой линии для туберкулеза HiMedia SL177-KT содержит четыре противотуберкулёзных препарата (изониазид, стрептомицин, этамбутол и рифампицин) и контрольный образец. Набор предназначен для определения чувствительности M. tuberculosis к антибиотикам в клинических лабораториях; в состав входят 5 скошенных агаров (4 с препаратами и 1 контроль).

Принцип измерения и интерпретация

Метод основан на корреляции in vitro между клиническим ответом на противомикробный агент и результатом тестирования чувствительности с помощью набора SL177. Это позволяет диагностировать профиль чувствительности возбудителя M. tuberculosis у пациента и подобрать соответствующую схему лекарственной терапии.

В диагностике различают два типа резистентности:

• Первичная лекарственная устойчивость: устойчивость организма, выделенного от пациента, который ранее не получал противотуберкулёзную терапию (вероятно, заражение резистентным штаммом из внешней среды).
• Приобретённая (вторичная) лекарственная устойчивость: развивается, в том числе, вследствие несоблюдения режима приёма препаратов.

Область применения и типы образцов

Набор используется для анализа клинических образцов (мокроты). Тест на чувствительность микобактерий может быть выполнен двумя способами:

1. Прямой тест: инокуляция непосредственно из переваренного и сконцентрированного мазка мокроты (положительного по микроскопии). Преимущество — сокращение срока получения результата до 3–4 недель. Однако возможны осложнения из-за разрастания других бактерий, выживших после деконтаминации.
2. Непрямой тест: инокуляция из чистой культуры микобактерий, выделенной из клинического образца. Срок получения результата может составлять от 5 до 7 недель.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Асептически возьмите петлю роста M. tuberculosis, первичного выделенного на скошенной среде Лёвенштейна-Йорданса (L. J.).
2. Суспендируйте образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в бутылочке с завинчивающейся крышкой. Для лучшей гомогенизации и деагрегации клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
3. Гомогенизируйте смесь на вортексе до 10 минут. Перед открытием бутылки выдержите суспензию 10 минут.
4. Доведите мутность суспензии до соответствия стандарту МакФарленда 0,5 с помощью физиологического раствора (примерно 1,5 × 10⁸ КОЕ/мл).
5. Разведите полученную суспензию в пропорции 1:10 000.

Процедура посева

Все работы должны проводиться в боксе биологической безопасности с соблюдением правил работы с культурами микобактерий.

• Для инокуляции используйте калиброванную петлю или микропипетку.
• Для прямого теста: нанесите 10 мкл обработанного образца мокроты (после деконтаминации и концентрирования) на скошенные среды.
• Для непрямого теста: используйте подготовленную чистую культуру микобактерий.

Контроль качества и интерпретация результатов

Внешний вид

Среды представляют собой гладкие скошенные агары бледно-голубого или зеленоватого цвета.

Культуральные характеристики

Инкубация проводится при температуре 35–37 °C в атмосфере 5–10 % CO₂ в течение 2–4 недель (в некоторых случаях рост может наблюдаться до 6–8 недель).

Ограничения метода

• На среде могут расти некоторые грамположительные контаминанты (например, стрептококки) и грамотрицательные бациллы.
• Возможен рост некоторых сапрофитов.
• Протеолитические контаминанты могут вызвать локальное или полное переваривание среды.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: при температуре +2…+8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Меры предосторожности: только для диагностики in vitro. Использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, защита глаз и лица).

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания. Все материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы. Рекомендуется погружение использованных скосов в подходящий дезинфектант (предпочтительно 2 % глутаральдегид) минимум на два часа перед утилизацией.