HiMedia SL177-KT Модифицированный набор первой линии для туберкулеза (1 набор)

Набор питательных сред HiMedia SL177-KT Модифицированный набор первой линии для туберкулеза (1 набор) производства HiMedia содержит четыре противотуберкулёзных препарата — изониазид, стрептомицин, этамбутол и рифампицин — и контрольную среду. Набор предназначен для определения лекарственной чувствительности M. tuberculosis в образцах мокроты или чистой культуре; хранение при получении — при 2–8 °C.

Назначение

HiMedia SL177-KT применяется для определения чувствительности M. tuberculosis к препаратам первой линии:

• изониазиду;
• стрептомицину;
• этамбутолу;
• рифампицину.

Набор содержит четыре противотуберкулёзных препарата и контрольную среду.

Состав

Состав: фирменный, не раскрывается производителем.

Тип образца

Клинические образцы: мокрота.

Методика проведения теста на лекарственную чувствительность

Работу с культурами и образцами микобактерий проводят с соблюдением надлежащих лабораторных процедур и требований биологической безопасности.

1. Все операции выполняйте в боксе биологической безопасности.
2. Для инокуляции используйте калиброванную петлю или микропипетку.
3. Тест на лекарственную чувствительность проводят одним из двух способов:
   1. непосредственно из образца мокроты, предварительно подвергнутого деконтаминации и концентрированию: нанесите 10 мкл обработанного образца на скошенные среды;
   2. из чистой культуры микобактерий, выделенной из клинического образца.
4. После использования все загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Прямой тест обычно проводят только для образцов, в которых микобактерии выявлены при микроскопии мазка. Наилучшие результаты прямой тест даёт при наличии большого количества микобактерий. Преимущество прямого теста заключается в более раннем получении отчёта о чувствительности — через 3–4 недели, тогда как непрямой тест может занимать до 5–7 недель. Прямой тест при этом может быть осложнён избыточным ростом других бактерий, сохранившихся после процедуры деконтаминации.

Приготовление инокулята

1. Асептически отберите петлёй часть роста M. tuberculosis, первоначально выделенного на скошенной среде Л. Й.
2. Суспендируйте образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды во флаконе с завинчивающейся крышкой.
3. Для лучшей гомогенизации и разрушения скоплений клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
4. Дополнительно гомогенизируйте смесь на вихревом смесителе в течение до 10 мин.
5. Перед открыванием флакона выдержите его в покое 10 мин.
6. Скорректируйте мутность суспензии по стандарту Мак-Фарланда 0,5 с использованием физиологического раствора. Получаемая концентрация составляет приблизительно 1,5 × 10⁸ КОЕ/мл.
7. Разведите приготовленную суспензию в соотношении 1:10 000.

Принцип и интерпретация

Принцип основан на корреляции между клиническим ответом на противомикробный препарат и результатом определения чувствительности in vitro. Набор SL177 позволяет определить профиль чувствительности M. tuberculosis у пациента и выбрать соответствующее лечение и лекарственную терапию.

Первичная лекарственная устойчивость M. tuberculosis определяется как устойчивость к противомикробному препарату у микроорганизма, выделенного от пациента, который ранее не получал противотуберкулёзную терапию. Таким образом, понятие первичной устойчивости относится к ранее не лечившимся пациентам, у которых выявлены устойчивые микроорганизмы, предположительно приобретённые из внешнего источника устойчивого M. tuberculosis.

Приобретённая, или вторичная, лекарственная устойчивость в значительной степени обусловлена несоблюдением режима приёма препаратов.

Условия культивирования и оценка результатов

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 % в течение 2–4 недель. Дополнительный рост может наблюдаться в течение 6–8 недель.

Контроль качества

Внешний вид: гладкие скошенные среды бледного голубовато-зелёного цвета, содержащие четыре противотуберкулёзных препарата — этамбутол, изониазид, рифампицин и стрептомицин — и контроль.

Тест на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики:

Ограничения

• На среде могут расти некоторые грамположительные контаминанты, например стрептококки, и грамотрицательные палочки.
• На среде также могут расти некоторые сапрофиты.
• Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное разрушение среды.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности можно уточнять в соответствующих паспортах безопасности.
• Все образцы и использованные скошенные среды перед утилизацией выдерживайте полностью погружёнными в подходящий дезинфицирующий раствор, предпочтительно 2 % глутаральдегида, не менее 2 ч.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.