HiMedia SL045T-25SL Среда трехсахарного железного агара в длинных пробирках

Готовая питательная микробиологическая среда HiMedia SL045T-25SL Среда трехсахарного железного агара в длинных пробирках предназначена для выявления ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы и образования H₂S. Среда применяется для идентификации грамотрицательных кишечных палочек по результатам посева изолированных микроорганизмов из воды, пищевых продуктов и клинических образцов; объём среды — 17 мл в стеклянной пробирке.

Назначение

Среда рекомендована для идентификации грамотрицательных кишечных палочек на основании ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы, а также образования сероводорода (H₂S).

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Пептон HM B# эквивалентен мясному экстракту.

Методика применения

1. Асептически внесите исследуемый инокулят штриховым посевом на скошенную часть среды.
2. Инкубируйте посев при соответствующих условиях.

Принцип измерения и интерпретация

Трёхсахарный железный агар (TSI) был первоначально предложен Sulkin и Willett и модифицирован Hajna для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда соответствует рекомендациям Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA) для исследования мяса и пищевых продуктов, исследования молока и молочных продуктов, проведения микробиологического предельного теста для подтверждения присутствия сальмонелл и идентификации грамотрицательных палочек.

Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают среду азотистыми соединениями, соединениями серы, микроэлементами, витаминами группы B и другими питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми углеводами. Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для выявления H₂S. Феноловый красный служит индикатором pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, изменяющие цвет среды с красного на жёлтый. В столбике среды образуется больше кислот в результате ферментации, чем в скошенной части в результате дыхания. Растущие бактерии также формируют щелочные продукты при окислительном декарбоксилировании пептона. Эти щелочные продукты нейтрализуют большое количество кислоты, присутствующей в столбике среды.

Появление щелочной скошенной части красного цвета и кислого жёлтого столбика после инкубации указывает, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не способен ферментировать лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу, либо оба углевода одновременно, дополнительно к глюкозе образуют большое количество кислоты. Это препятствует обратному изменению pH в соответствующей зоне, поэтому скошенная часть и столбик среды приобретают кислую реакцию.

Образование газа выявляют по наличию трещин или пузырьков в среде, возникающих при выходе накопившегося газа. Тиосульфат восстанавливается некоторыми видами бактерий до сероводорода. Сероводород взаимодействует с ионами трёхвалентного железа солей железа с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно наблюдается в столбике пробирки.

Результаты реакций интерпретируют следующим образом:

• Щелочная скошенная часть / кислый столбик: ферментируется только глюкоза.
• Кислая скошенная часть / кислый столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Пузырьки или трещины: образование газа.
• Чёрный осадок: образование газа H₂S.

Исследуемый материал

Изолированные микроорганизмы из:

• воды;
• пищевых продуктов;
• клинических образцов.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых продуктов и молочных образцов применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно руководствам по исследованию пищевых продуктов, молока и молочных продуктов.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Некоторые представители семейства Enterobacteriaceae и сальмонеллы, продуцирующие H₂S, могут не давать положительную реакцию на H₂S на агаре TSI.
2. Некоторые бактерии могут образовывать H₂S на железном агаре Клиглера, но не на агаре TSI. Это возможно из-за того, что утилизация сахарозы в агаре TSI подавляет ферментативный путь, приводящий к образованию H₂S.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный скошенный трёхсахарный железный агар в стеклянной пробирке.

Цвет среды

Скошенная часть красного цвета.

Количество среды

17 мл среды в стеклянной пробирке.

pH

7,20–7,60.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.