HiMedia SL045T-10SL Среда трехсахарного железного агара в длинных пробирках

Готовая питательная среда HiMedia SL045T-10SL Среда трехсахарного железного агара в длинных пробирках для идентификации грамотрицательных кишечных палочек по ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы и образованию сероводорода H₂S. Среда применяется для анализа изолированных микроорганизмов из воды, пищевых продуктов и клинических образцов; поставляется в виде скошенного агара в стеклянных пробирках и хранится при 2–8 °C.

Назначение

Среда рекомендована для идентификации грамотрицательных кишечных палочек на основании ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы, а также образования сероводорода H₂S.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

# Эквивалент мясного экстракта.

Методика применения

1. Асептически нанесите исследуемый инокулят штрихом на скошенную поверхность среды.
2. Инкубируйте при соответствующих условиях.

Принцип действия и интерпретация результатов

Трёхсахарный железный агар первоначально предложен Sulkin и Willett (1), а затем модифицирован Hajna (2) для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда соответствует рекомендациям APHA для исследования мяса и пищевых продуктов (3), молока и молочных продуктов (4), проведения микробиологического предельного теста для подтверждения присутствия Salmonella (5, 6), а также идентификации грамотрицательных палочек (5, 7).

Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают среду азотистыми соединениями, серой, микроэлементами, витаминами группы B и другими питательными компонентами. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми углеводами. Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для определения H₂S. Феноловый красный используется как индикатор pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, изменяющие цвет среды с красного на жёлтый. В столбике среды при ферментации выделяется больше кислот, чем на скошенной поверхности, где преобладает дыхание. Растущие бактерии также образуют щелочные продукты в результате окислительного декарбоксилирования пептона. Эти щелочные продукты нейтрализуют большое количество кислоты, присутствующей в столбике среды.

Поэтому появление щелочной красной скошенной поверхности и кислого жёлтого столбика после инкубации указывает, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не способен ферментировать лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу, либо оба сахара одновременно, дополнительно к глюкозе образуют большое количество кислоты. В этой области не происходит возврата pH к исходному значению, поэтому на скошенной поверхности и в столбике наблюдается кислая реакция.

Образование газа определяется по наличию трещин или пузырьков в среде, возникающих при выходе накопившегося газа. Несколько видов бактерий восстанавливают тиосульфат до сероводорода. H₂S взаимодействует с ионами железа в железосодержащих солях с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно наблюдается в столбике пробирки.

Основные реакции интерпретируются следующим образом:

• Щелочная скошенная поверхность / кислый столбик: ферментируется только глюкоза.
• Кислая скошенная поверхность / кислый столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, глюкоза и лактоза либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Наличие пузырьков или трещин: образование газа.
• Наличие чёрного осадка: образование сероводорода H₂S.

Тип образца

Изолированный микроорганизм из:

• воды;
• пищевых продуктов;
• клинического образца.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам (8, 9).
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам (3, 4).
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным стандартам (5).
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к правилам безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

1. Некоторые представители Enterobacteriaceae и продуцирующие H₂S штаммы Salmonella могут не давать положительной реакции на H₂S на трёхсахарном железном агаре (TSI).
2. Некоторые бактерии могут образовывать H₂S на железном агаре Клиглера, но не на агаре TSI. Это возможно потому, что утилизация сахарозы в TSI подавляет ферментативный путь, приводящий к образованию H₂S.

Эффективность и оценка

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный скошенный трёхсахарный железный агар в стеклянном флаконе.

Цвет среды

Скошенная поверхность красного цвета.

Количество среды

17 мл среды в стеклянной пробирке.

pH

7,20–7,60.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения:

• * Соответствующие номера