HiMedia SL045-25SL Среда трехсахарного железного агара

Питательная среда HiMedia SL045-25SL Среда трехсахарного железного агара для идентификации грамотрицательных кишечных палочек по ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы и образованию H₂S. Используется для анализа изолированных микроорганизмов из воды, пищевых продуктов и клинических образцов; хранится при 2–8 °C.

Назначение

Среда рекомендована для идентификации грамотрицательных кишечных палочек по следующим признакам:

• ферментация декстрозы;
• ферментация лактозы;
• ферментация сахарозы;
• образование сероводорода (H₂S).

Тип образца: изолированный микроорганизм из воды, пищевого продукта или клинического образца.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик. HM Peptone B эквивалентен экстракту говядины.

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите исследуемый инокулят штрихом на скошенную часть среды.
2. Инкубируйте при соответствующих условиях.

Сбор и обращение с образцами

• При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Принцип измерения и интерпретация

Трёхсахарный железный агар (TSI) первоначально предложен Sulkin и Willett и модифицирован Hajna для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда соответствует рекомендациям APHA по исследованию мяса и пищевых продуктов, исследованию молока и молочных продуктов, проведению микробиологического предельного теста для подтверждения присутствия Salmonella и идентификации грамотрицательных палочек.

Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и HM Peptone B обеспечивают среду азотистыми соединениями, серой, микроэлементами и витаминами группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми углеводами. Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для выявления H₂S. Феноловый красный служит индикатором pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, изменяя цвет среды с красного на жёлтый. В столбике среды при ферментации выделяется больше кислот, чем в скошенной части, где преобладают процессы дыхания. Растущие бактерии также образуют щелочные продукты в результате окислительного декарбоксилирования пептона. Эти щелочные продукты нейтрализуют большое количество кислоты, присутствующее в столбике среды.

Щелочная красная скошенная часть и кислая жёлтая нижняя часть после инкубации указывают, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не способен ферментировать лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу либо оба углевода одновременно в дополнение к глюкозе, образуют большое количество кислоты. В этой области pH не возвращается к исходному значению, поэтому скошенная часть и столбик среды остаются кислыми.

Образование газа выявляют по трещинам или пузырькам в среде, возникающим при выходе накопившегося газа. Тиосульфат восстанавливается некоторыми видами бактерий до сероводорода. H₂S взаимодействует с ионами железа железосодержащих солей с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно возникает в столбике пробирки.

Интерпретация реакций

• Щелочная скошенная часть / кислый столбик: ферментирована только глюкоза.
• Кислая скошенная часть / кислый столбик: ферментированы глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Наличие пузырьков или трещин: образование газа.
• Наличие чёрного осадка: образование газа H₂S.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная скошенная среда трёхсахарного железного агара во флаконе из стекла.

Цвет среды

Скошенная часть красного цвета.

Объём среды

17 мл среды в стеклянной пробирке.

pH

7,20–7,60.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
Klebsiella aerogenes ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.
Proteus hauseri ранее обозначался как Proteus vulgaris.

Ограничения применения

Некоторые представители семейства Enterobacteriaceae и Salmonella, образующие H₂S, могут не демонстрировать положительную реакцию на H₂S на трёхсахарном железном агаре. Некоторые бактерии могут образовывать H₂S на железном агаре Клиглера, но не на трёхсахарном железном агаре. Это может происходить из-за того, что утилизация сахарозы в трёхсахарном железном агаре подавляет ферментативный путь, приводящий к образованию H₂S.

Условия хранения и срок годности

• При получении хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды гарантируются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Меры безопасности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики