HiMedia SL045-10SL Среда трехсахарного железного агара

Питательная среда HiMedia SL045-10SL Среда трехсахарного железного агара — готовая агаризованная среда на основе декстрозы, лактозы и сахарозы для дифференциации микроорганизмов. Среда применяется для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл по ферментации углеводов и образованию сероводорода (H₂S) в образцах воды, пищевых продуктов и клиническом материале.

Назначение

Среда рекомендована для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл по ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы, а также по образованию сероводорода (H₂S).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Методика применения

1. Асептически нанесите исследуемый инокулят штрихом на скошенную часть среды.
2. Инкубируйте при соответствующих условиях.

Принцип действия и интерпретация результатов

Трёхсахарный железный агар первоначально предложен Sulkin и Willett и модифицирован Hajna для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда соответствует рекомендациям APHA для исследования мяса и пищевых продуктов, исследования молока и молочных продуктов, проведения микробиологического предельного теста для подтверждения наличия Salmonella, а также идентификации грамотрицательных бацилл.

• Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают среду азотистыми соединениями, серой, микроэлементами и витаминами группы B.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми углеводами.
• Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для определения H₂S.
• Феноловый красный служит индикатором pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, в результате чего цвет среды изменяется с красного на жёлтый. В столбике среды при ферментации выделяется больше кислот, чем в скошенной части, где преобладают процессы дыхания. Растущие бактерии также образуют щелочные продукты окислительного декарбоксилирования пептона. Эти щелочные продукты нейтрализуют значительное количество кислоты, присутствующей в столбике среды.

Щелочная скошенная часть красного цвета и кислая жёлтая нижняя часть после инкубации указывают, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не способен ферментировать лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу, либо оба углевода одновременно с глюкозой, образуют большое количество кислоты. В этой области обратного изменения pH не происходит, поэтому скошенная часть и столбик среды остаются кислыми.

Образование газа выявляют по появлению трещин или пузырьков в среде, возникающих при выходе накопившегося газа. Газ может содержать CO₂.

Тиосульфат восстанавливается несколькими видами бактерий до сероводорода. H₂S взаимодействует с ионами железа железосодержащих солей с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно наблюдается в столбике пробирки.

Реакции интерпретируют следующим образом:

• Щелочная скошенная часть / кислый столбик: ферментируется только глюкоза.
• Кислая скошенная часть / кислый столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Наличие пузырьков или трещин: образование газа.
• Наличие чёрного осадка: образование H₂S.

Тип исследуемого материала

Выделенный микроорганизм из:

• воды;
• пищевых продуктов;
• клинического образца.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно руководствам.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности могут быть указаны в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Некоторые представители семейства Enterobacteriaceae и продуцирующие H₂S штаммы Salmonella могут не давать положительную реакцию на H₂S на трёхсахарном железном агаре. Некоторые бактерии образуют H₂S на железном агаре Клиглера, но не на трёхсахарном железном агаре. Это может происходить из-за того, что утилизация сахарозы в трёхсахарном железном агаре подавляет ферментативный путь, приводящий к образованию H₂S.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный скошенный трёхсахарный железный агар в стеклянном флаконе.

Цвет среды

Скошенная часть красного цвета.

Количество среды

17 мл среды в стеклянной пробирке.

pH

7,20–7,60.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
Klebsiella aerogenes ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.
Proteus hauseri ранее обозначался как Proteus vulgaris.

Условия хранения и срок годности

• При получении хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригод