Среда для микробиологических исследований HiMedia SL044-10SL Среда фенилаланинового агара представляет собой стерильную агаризованную среду в пробирке со скошенной поверхностью. Среда предназначена для дифференциации групп Proteus и Providencia от других представителей семейства Enterobacteriaceae по способности образовывать фенилпировиноградную кислоту из фенилаланина; объём среды в пробирке составляет 8 мл, конечный pH — 7,3 ± 0,2.

Назначение

Среда фенилаланинового агара рекомендована для дифференциации групп Proteus и Providencia от других представителей Enterobacteriaceae на основании способности микроорганизмов образовывать фенилпировиноградную кислоту из фенилаланина.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Способность видов Proteus превращать фенилаланин в фенилпировиноградную кислоту является важной реакцией для дифференциации представителей Enterobacteriaceae. На этом критерии основана разработанная Buttiaux среда фенилаланинового агара, предназначенная для дифференциации групп Proteus и Providencia от других представителей Enterobacteriaceae по способности микроорганизмов родов, входящих в группу Proteus, дезаминировать фенилаланин. Среда фенилаланинового агара является модификацией среды, первоначально разработанной Ewing и соавторами.

• Дрожжевой экстракт поддерживает рост микроорганизмов.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Фенилаланин служит субстратом для ферментов, способных дезаминировать его с образованием фенилпировиноградной кислоты.
• При положительной реакции присутствующая в культуре фенилпировиноградная кислота взаимодействует с солью железа в реагенте с образованием зелёного окрашивания.
• При отрицательной реакции изменения окраски не происходит.
• После добавления реагента положительную или отрицательную реакцию необходимо оценить в течение 5 мин, поскольку зелёное окрашивание быстро исчезает.

Методика проведения анализа

1. Асептически внесите исследуемый инокулят штрихом на поверхность скошенной части среды.
2. Инкубируйте скошенную среду при подходящих условиях. Для данной процедуры указана инкубация при 30–35 °C в течение 18–24 ч.
3. В рекомендуемой методике поверхность скошенной части инокулируют большим количеством инокулята и инкубируют в течение 12–16 ч.
4. После инкубации добавьте 0,2 мл 10%-ного раствора хлорида железа(III), чтобы раствор полностью покрыл поверхность роста.
5. Допускается добавление 0,2 мл, или 3–5 капель, 10%-ного водного раствора хлорида железа(III). Альтернативный вариант — 12%-ный водный раствор хлорида железа(III), подкисленный добавлением 2,5 мл концентрированной соляной кислоты на 100 мл реагента.
6. Светло-зелёное или тёмно-зелёное окрашивание указывает на положительную реакцию.
7. Отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.
8. Оцените результат в течение 5 мин после добавления реагента, так как зелёное окрашивание быстро бледнеет.

Тип исследуемого материала

Тип образца: выделенный микроорганизм.

Сбор и обращение с образцами

Рекомендуется инокулировать поверхность скошенной части большим количеством инокулята и инкубировать в течение 12–16 ч. После инкубации добавляют 0,2 мл 10%-ного раствора хлорида железа(III), чтобы раствор полностью покрыл поверхность роста.

Допускается добавление 0,2 мл, или 3–5 капель, 10%-ного водного раствора хлорида железа(III). Вместо него можно использовать 12%-ный водный раствор хлорида железа(III), подкисленный добавлением 2,5 мл концентрированной соляной кислоты на 100 мл реагента. После добавления раствора к инкубированным культурам появляется светло-зелёное или тёмно-зелёное окрашивание при положительной реакции либо отсутствует изменение окраски при отрицательной реакции.

При положительной реакции содержащаяся в культуре фенилпировиноградная кислота взаимодействует с солью железа в реагенте с образованием зелёного окрашивания. Результат необходимо интерпретировать в течение 5 мин после добавления реагента, поскольку зелёное окрашивание быстро бледнеет.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностического применения in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности для получения указаний по безопасной работе.

Ограничения применения

1. Из-за вариаций питательных потребностей некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для подтверждения результата необходимо провести другие биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: стерильная среда фенилаланинового агара со скошенной поверхностью в стеклянной пробирке.

Цвет среды

Цвет среды: жёлтая скошенная поверхность.

Количество среды

Количество среды: 8 мл в стеклянной пробирке.

pH

pH: 7,10–7,50.

Проверка стерильности

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• — соответствующие номера WDCM.

— ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: SL044-10SL
• Назначение изделия: среда
• Форма выпуска: агаризованная среда со скошенной поверхностью
• Материал пробирки: стекло
• Объём среды: 8 мл
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Контролируемый pH: 7,10–7,50
• Температура хранения: 2–8 °C
• Исследуемый материал: выделенный микроорганизм
• Применение: диагностика in vitro, только для профессионального использования