HiMedia SL043-25SL Среда нитратного агара

Среда нитратного агара HiMedia SL043-25SL предназначена для обнаружения нитратредуцирующих бактерий. Используется для дифференциации и идентификации различных типов бактерий, в особенности семейства Enterobacteriaceae, путем определения их способности восстанавливать нитраты.

Принцип измерения и интерпретация

Среда приготовлена в соответствии с формулой, опубликованной в «Pure Culture Study of Bacteria of the Society of American Bacteriologist». Нитрат калия в составе среды служит субстратом для определения способности бактерий восстанавливать нитраты.

Некоторые бактерии восстанавливают нитрат до нитрита, аммиака или газообразного азота. Присутствие нитритов определяется путем добавления по 0,5 мл сульфаниловой кислоты (R015) и раствора альфа-нафтиламина (R009). Появление красно-фиолетового окрашивания (образование красного диазонированного красителя п-сульфензобензол-азо-альфа-нафтиламина) указывает на восстановление нитрата до нитрита.

Если окрашивание не развивается, это означает, что либо нитрат не восстанавливался, либо произошло дальнейшее восстановление до аммиака или азота. Для проверки добавляют щепотку цинковой пыли:

• Цинк восстанавливает остаточный нитрат до нитрита, что вызывает красное окрашивание. Это свидетельствует о том, что нитрат присутствовал и не был восстановлен бактериями.
• Отсутствие красного цвета после добавления цинка указывает на то, что нитрат полностью восстановлен до форм, более глубоких, чем нитрит.

Представители Enterobacteriaceae характерно восстанавливают нитрат до нитрита, который вступает в реакцию Грисса с сульфаниловой кислотой и N,N-диметил-1-нафтиламином, образуя красный цвет.

Методика проведения анализа

1. Асептически внесите исследуемый инокулят штрихом на скос агара.
2. Инкубируйте скосы при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.
3. Для проведения теста добавьте в пробирку с культурой по несколько капель каждого реагента: сульфаниловой кислоты (R015) и раствора альфа-нафтиламина (R009).
4. Отчетливый красный или розовый цвет указывает на восстановление нитрата.
5. Обязательно протестируйте контрольную (непосеянную) пробирку.
6. При отсутствии розового окрашивания добавьте щепотку цинковой пыли для подтверждения полного отсутствия нитрата в среде.

Важное примечание: Если организм растет быстро и активно восстанавливает нитраты, тест следует проводить после короткого периода инкубации, так как нитрит может быть быстро восстановлен до азота.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Параметры контроля качества

• Внешний вид: стерильный скос нитратного агара в стеклянной пробирке
• Цвет среды: светло-янтарный
• Объем среды в пробирке: 8 мл
• Стерильность: соответствует критериям выпуска
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

*Соответствующие номера WDCM. #Ранее именовался как Enterobacter aerogenes.

Область применения

Среда используется для анализа изолированных микроорганизмов из следующих источников:

• Клинические образцы.
• Образцы пищевых продуктов.
• Образцы молочной продукции.

Ограничения и предостережения

• Восстановление нитрата не является подтверждающим тестом. Полная идентификация бактерий должна включать морфологический анализ, определение реакции по Граму, биохимические и серологические тесты.
• Добавление избытка цинка может привести к ложноотрицательной реакции.
• При использовании $\alpha$-нафтиламина цвет положительной реакции может быстро блекнуть.
• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После использования контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.