Питательная микробиологическая среда HiMedia SL035-25SL «Среда мочевинного агара» предназначена для выявления продукции уреазы. Среда применяется для исследования изолированных микроорганизмов из клинических, пищевых и водных образцов; инкубация проводится при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Мочевинный агар рекомендуется для выявления продукции уреазы, особенно у Proteus vulgaris, микрококков и параколон-организмов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика применения

1. Асептически нанесите исследуемый инокулят штрихом на скошенную часть среды.
2. Инкубируйте скошенную среду в соответствующих условиях.
3. Проводите инкубацию при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Принцип действия и интерпретация

Мочевинный агар применяется для выявления продукции уреазы. Мочевинный агар по Кристенсену выявляет уреазную активность у всех быстро уреазоположительных микроорганизмов рода Proteus, а также у других представителей семейства Enterobacteriaceae, у которых уреазная реакция проявляется с задержкой.

Изменение состава среды для выявления замедленной уреазной реакции основано на следующих принципах:

• добавление глюкозы в питательную среду;
• снижение концентрации пептона;
• уменьшение буферной ёмкости, поскольку менее буферизованная среда позволяет выявлять даже небольшое количество щёлочи.

Пептон служит источником необходимых питательных веществ. Декстроза является источником энергии. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды, а фосфаты выполняют буферную функцию. При гидролизе мочевины высвобождается аммиак. Индикатор феноловый красный выявляет возникающую щёлочность по видимому изменению окраски от оранжевой до розовой.

Продолжительная инкубация может привести к щелочной реакции среды. Для исключения ложноположительных результатов в качестве отрицательного контроля используют среду без мочевины. Все среды для исследования мочевины основаны на выявлении образования щёлочи, поэтому они не предназначены для определения абсолютной скорости уреазной активности. Использование белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белков, а высвобождение избытка аминокислот может приводить к ложноположительной реакции.

Тип образца

Изолированные микроорганизмы из:

• клинических образцов;
• пищевых образцов;
• образцов воды.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам (5, 6, 7).

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям (8).

Для клинических образцов соблюдайте соответствующие методы обращения с пробами согласно установленным руководствам (9, 10).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Для получения дополнительных сведений по безопасности обращайтесь к соответствующим паспортам безопасности.

Ограничения применения

1. Продолжительная инкубация может привести к щелочной реакции среды.
2. Все среды для исследования мочевины основаны на выявлении образования щёлочи и поэтому не являются специфичными для определения абсолютной скорости уреазной активности.
3. Использование белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белков, а высвобождение избытка аминокислот может приводить к ложноположительной реакции.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкциями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

• Внешний вид: стерильный мочевинный агар на скошенной поверхности в стеклянной пробирке.
• Цвет среды: желтовато-оранжевая скошенная поверхность.
• Объём среды: 8 мл в стеклянной пробирке.
• pH: 6,60–7,00.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее организм обозначался как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками (9, 10).