HiMedia SL033-25SL Среда агара для подвижности, индола и лизина

Питательная среда HiMedia SL033-25SL Среда агара для подвижности, индола и лизина предназначена для выявления подвижности, декарбоксилазной и дезаминазной активности по лизину, а также продукции индола. Среда применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae по четырём дифференциальным реакциям в одной культуральной пробирке; постановку реакции на индол выполняют после регистрации остальных реакций.

Назначение

Среда предназначена для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae на основании:

• подвижности;
• декарбоксилирования лизина;
• дезаминирования лизина;
• продукции индола.

Тип образца: выделенный микроорганизм.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Методика проведения анализа

1. Асептически внесите исследуемый инокулят уколом в столбик среды.
2. Инкубируйте при соответствующих условиях. В соответствии с указаниями для среды инкубируйте столбики при 30–35 °C в течение 18–24 ч.
3. Реакции на подвижность, дезаминирование лизина и декарбоксилирование лизина оцените до постановки реакции на индол.
4. Для определения индола добавьте реактив Ковача на поверхность агара и оцените образование красного комплекса.

Принцип измерения и интерпретация реакций

Среда MIL приготовлена по рецептуре Reller и Merrett. Среда предназначена для дифференциальной идентификации Enterobacteriaceae и позволяет одновременно оценивать четыре реакции в одной культуральной пробирке.

Среду рекомендуется применять совместно с трёхсахарным железным агаром (TSI, M021) и мочевинным агаром (M112) для предварительной идентификации представителей Enterobacteriaceae в фекальных образцах.

Пептон, триптон и дрожжевой экстракт поставляют аминокислоты и другие сложные азотистые вещества. Декстроза служит источником энергии. Небольшое количество агара обеспечивает выявление подвижности вдоль линии посева:

• подвижные микроорганизмы растут за пределами линии укола;
• неподвижные микроорганизмы растут только вдоль линии укола.

Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH.

При внесении микроорганизма, ферментирующего декстрозу, образуются кислоты, снижающие pH и вызывающие изменение окраски среды с пурпурной на жёлтую. Кислый pH также стимулирует активность ферментов-декарбоксилаз. Микроорганизмы, обладающие специфической декарбоксилазой, разлагают аминокислоту, содержащуюся в среде, с образованием соответствующего амина.

Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина. Образование аминов повышает pH и вызывает восстановление пурпурной окраски среды в нижней части пробирки. Среда в верхней части пробирки остаётся кислой из-за более высокого содержания кислорода. Если исследуемый микроорганизм не образует требуемую декарбоксилазу, среда остаётся жёлтой, то есть кислой, по всей высоте либо становится жёлтой с пурпурной или красной реакцией в верхней части.

Дезаминирование лизина вызывает изменение окраски в верхней части среды. В результате окислительного дезаминирования лизина образуется соединение, которое реагирует с цитратом аммония и железа с образованием бордово-красной или красно-коричневой окраски в верхнем сантиметре среды; нижняя часть среды остаётся кислой. Реакцию можно выявить только при отсутствии декарбоксилазы лизина, что характерно для видов родов Proteus, Morganella и Providencia.

Индол образуется микроорганизмами, содержащими фермент триптофаназу. Триптофаназа расщепляет триптофан, присутствующий в казеиновом пептоне, с образованием индола. Индол выявляют после добавления реактива Ковача на поверхность агара: индол взаимодействует с п-диметиламинобензальдегидом реактива Ковача с образованием красного комплекса.

Культуры инокулируют уколом и инкубируют при 37 °C в течение 18–24 ч. Реакции на подвижность, дезаминирование лизина и декарбоксилирование лизина считывают до проверки реакции на индол, поскольку добавление реактива Ковача вызывает изменение окраски среды на жёлтую. В противном случае положительная реакция на декарбоксилазу лизина может быть ошибочно интерпретирована как отрицательная.

Указания по работе с образцами

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно утверждённым руководствам и установленным процедурам.

После использования контаминированные материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Реакции на подвижность, дезаминирование лизина и декарбоксилирование лизина необходимо считывать до реакции на индол, поскольку добавление реактива Ковача изменяет цвет среды на жёлтый. Положительная реакция на декарбоксилазу лизина может быть ошибочно интерпретирована как отрицательная.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная скошенная среда агара для подвижности, индола и лизина в стеклянной пробирке.

Цвет среды

Среда красновато-пурпурного цвета.

Количество среды

8 мл среды в стеклянной пробирке.

pH

pH: 6,40–6,80.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.