HiMedia SL033-10SL Среда агара для подвижности, индола и лизина

Дифференциально-диагностическая среда HiMedia SL033-10SL «Агар для подвижности, индола и лизина» (MIL) предназначена для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae. Анализ проводится на основании оценки подвижности микроорганизмов, активности лизин-декарбоксилазы, лизин-дезаминазы и продукции индола.

Область применения

Среда используется для идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae, особенно при работе с фекальными образцами. Для проведения презумптивной идентификации рекомендуется использовать MIL-агар совместно с трёхуглеводным железным агаром (TSI) (M021) и агаром с мочевиной (M112).

Принцип измерения и интерпретация результатов

Среда приготовлена по методике Реллера и Мерретта. Она позволяет определить четыре дифференциальные реакции в одной культурологической пробирке.

Механизм реакций

• Питательные компоненты: Пептон, триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают организм аминокислотами и сложными азотистыми веществами. Декстроза служит источником энергии.
• Подвижность: Небольшое количество агара позволяет визуализировать подвижность вдоль линии посева. Подвижные организмы растут, распространяясь за пределы линии инокуляции; неподвижные — растут строго вдоль линии.
• Индикатор pH: Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором. При ферментации декстрозы образуются кислоты, pH снижается, и цвет среды меняется с пурпурного на жёлтый.
• Лизин-декарбоксилаза: Кислая среда стимулирует активность фермента декарбоксилазы. Организмы, обладающие специфической декарбоксилазой, расщепляют лизин с образованием соответствующего амина (кадаверина). Это повышает pH, и нижняя часть столбика среды снова становится пурпурной. Верхняя часть остаётся кислой из-за более высокого парциального давления кислорода. Если декарбоксилаза отсутствует, среда остаётся жёлтой по всей длине или жёлтой с пурпурной/красной реакцией у поверхности.
• Лизин-дезаминаза: Окислительное дезаминирование лизина приводит к образованию соединения, которое реагирует с цитратом аммония железа (III), окрашивая верхний сантиметр среды в бордово-красный или красно-коричневый цвет (при этом нижняя часть остаётся кислой). Эта реакция обнаруживается только при отсутствии лизин-декарбоксилазы (характерно для видов Proteus, Morganella и Providencia).
• Продукция индола: Организмы, обладающие триптофаназой, расщепляют триптофан (содержится в казеиновом пептоне) с выделением индола. Индол обнаруживается при добавлении реактива Ковака: он взаимодействует с п-диметиламинобензальдегидом, образуя красное кольцо на поверхности среды.

Методика проведения анализа

1. Асептически внесите тест-инокулят методом укола (stab) в столбик агара.
2. Инкубируйте пробирки при температуре 30–35 °C в течение 18–24 часов.
3. Важно: Сначала оцените подвижность, реакции дезаминирования и декарбоксилирования лизина, и только после этого проверяйте реакцию на индол. Добавление реактива Ковака окрашивает среду в жёлтый цвет, что может привести к ошибочной интерпретации положительной реакции декарбоксилазы как отрицательной.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Параметры качества

• Внешний вид: Стерильный скос агара в стеклянной пробирке.
• Цвет среды: Красно-пурпурный.
• Объем среды в пробирке: 8 мл.
• Диапазон pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения при получении: 2–8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.
• Требования к безопасности: Только для диагностики in vitro и профессионального использования. При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: Контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или подвергнуты инсинерации.