Питательная дифференциальная среда HiMedia SL033-10SL Среда агара для подвижности, индола и лизина производства HiMedia предназначена для одновременного определения четырёх реакций у представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда применяется для идентификации изолированных микроорганизмов по подвижности, декарбоксилированию и дезаминированию лизина, а также продукции индола; предназначена только для профессионального применения и диагностики in vitro.

Назначение

Среда предназначена для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae на основании следующих реакций:

• подвижность микроорганизма;
• декарбоксилирование лизина;
• дезаминирование лизина;
• образование индола.

Тип образца: изолированный микроорганизм.

Среду рекомендуется использовать совместно с трёхсахарным железным агаром TSI (M021) и мочевинным агаром (M112) для предварительной идентификации представителей Enterobacteriaceae в фекальных образцах.

Состав

Формула среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Среда MIL приготовлена по рецептуре Reller и Merrett и обеспечивает четыре дифференциальные реакции в одной культуральной пробирке.

Пептон, триптон и дрожжевой экстракт поставляют аминокислоты и другие сложные азотистые соединения. Декстроза служит источником энергии. Небольшое количество агара обеспечивает выявление подвижности вдоль линии посева. Подвижные микроорганизмы растут за пределами линии прокола, тогда как неподвижные микроорганизмы развиваются только вдоль линии посева. Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH.

При посеве микроорганизма, ферментирующего декстрозу, образуются кислоты, pH снижается, а цвет индикатора в среде изменяется с пурпурного на жёлтый. Кислая реакция среды также стимулирует активность ферментов декарбоксилаз. Микроорганизмы, обладающие специфической декарбоксилазой, расщепляют аминокислоту, содержащуюся в среде, с образованием соответствующего амина.

Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина. Образование аминов повышает pH и вызывает обратное изменение цвета среды в нижней части пробирки на пурпурный. Среда в верхней части пробирки остаётся кислой из-за более высокого содержания кислорода. Если исследуемый микроорганизм не образует соответствующую декарбоксилазу, среда остаётся жёлтой, то есть кислой, по всей высоте либо становится жёлтой с пурпурной или красной реакцией в верхней части.

Дезаминирование лизина вызывает изменение окраски верхней части среды. В результате окислительного дезаминирования лизина образуется соединение, реагирующее с цитратом аммонийного железа с образованием бордово-красной или красно-коричневой окраски в верхнем сантиметре среды. Нижняя часть среды при этом остаётся кислой. Реакцию можно выявить только при отсутствии декарбоксилазы лизина; такая характеристика наблюдается у видов родов Proteus, Morganella и Providencia.

Индол образуется микроорганизмами, содержащими фермент триптофаназу. Триптофаназа расщепляет триптофан, присутствующий в казеиновом пептоне, с образованием индола. Для выявления индола на поверхность агара добавляют реактив Ковача. Индол взаимодействует с п-диметиламинобензальдегидом реактива Ковача с образованием красного комплекса.

Культуры инокулируют проколом и инкубируют при 37 °C в течение 18–24 ч. Реакции подвижности, дезаминирования лизина и декарбоксилирования лизина считывают до проверки реакции на индол, поскольку добавление реактива Ковача изменяет цвет среды на жёлтый. Поэтому положительная реакция декарбоксилазы лизина может быть ошибочно интерпретирована как отрицательная.

Методика проведения

1. Асептически внесите исследуемый инокулят проколом в столбик среды.
2. Инкубируйте пробирку с посевом в подходящих условиях.
3. Для инкубации столбиков используйте температуру 30–35 °C и выдержку 18–24 ч.
4. В описании принципа для культур также указаны условия инкубации 37 °C в течение 18–24 ч.
5. Сначала оцените подвижность, дезаминирование лизина и декарбоксилирование лизина.
6. После этого проведите реакцию на индол, добавив реактив Ковача на поверхность агара.
7. Положительную реакцию на индол регистрируйте по образованию красного комплекса, обычно в виде красного кольца на границе среды после добавления реактива Ковача.

Технические характеристики

• Тип продукта: среда.
• Форма: стерильный агар для определения подвижности, индола и лизина в пробирке со стеклянным корпусом.
• Объём среды: 8 мл в стеклянной пробирке.
• Цвет среды: красно-пурпурный.
• pH по контролю качества: 6,40–6,80.
• Контроль стерильности: соответствует критериям выпуска.
• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Тип образца: изолированный микроорганизм.
• Назначение: диагностика in vitro.
• Условия применения: только для профессионального использования.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся наименование: Enterobacter aerogenes.

Требования к сбору и обращению с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Использовать только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной работы.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Инструкции по безопасности можно найти в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Реакции подвижности, дезаминирования лизина и декарбоксилирования лизина необходимо оценивать до проведения реакции на индол. Добавление реактива Ковача изменяет цвет среды на жёлтый, поэтому положительная реакция декарбоксилазы лизина может быть ошибочно интерпретирована как отрицательная.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный скошенный агар для определения подвижности, индола и лизина в стеклянной пробирке.

Цвет среды

Среда красно-пурпурного цвета.

Количество среды

8 мл среды в стеклянной пробирке.

pH

6,40–6,80.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Эффективность среды

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Хранение и срок годности

При получении хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.