HiMedia SL032-25SL Среда агара Клиглера железного

Питательная дифференциальная среда HiMedia SL032-25SL Среда агара Клиглера железного предназначена для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл по ферментации декстрозы, лактозы и образованию H₂S. Среда применяется для анализа выделенных микроорганизмов из клинических, пищевых, молочных и водных образцов; рекомендуемая инкубация составляет 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Среда агара Клиглера железного используется для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных бацилл на основании:

• ферментации декстрозы;
• ферментации лактозы;
• образования сероводорода (H₂S);
• образования газа.

Материалом для посева служат выделенные микроорганизмы из клинических, пищевых, молочных и водных образцов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. HM Peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Методика проведения анализа

1. Асептически штриховым посевом внесите исследуемый инокулят на скошенную часть среды.
2. Инкубируйте пробирки со скошенной средой в подходящих условиях при 30–35 °C в течение 18–24 ч.
3. Интерпретируйте результаты по окраске скошенной части и столбика среды, образованию газа и почернению среды вследствие продукции H₂S.

Для идентификации на агар Клиглера железного высевают чистые культуры предполагаемых микроорганизмов, полученные на дифференциально-диагностических средах, включая:

• агар МакКонки (M081);
• висмут-сульфитный агар (M027);
• дезоксихолат-цитратный агар (M065);
• агар SS (M108).

Принцип измерения и интерпретация

Агар Клиглера железного сочетает свойства среды с ацетатом свинца, описанной Клиглером, и агара Рассела с двумя сахарами и применяется как дифференциальная среда для тифозных, дизентерийных и родственных бацилл.

Феноловый красный используется как индикатор pH и изменяет цвет в ответ на образование кислоты при ферментации сахаров. Ферментация декстрозы приводит к образованию кислоты и изменению окраски индикатора с красной на жёлтую. Поскольку содержание декстрозы невелико, образование кислоты ограничено. В аэробной верхней части среды происходит повторное окисление индикатора, поэтому скошенная часть вновь остаётся красной.

При ферментации лактозы образуется значительное количество кислоты, препятствующее повторному окислению индикатора; вся среда окрашивается в жёлтый цвет. Наличие в составе лактозы и глюкозы (декстрозы), а также пептона, HM Peptone B и дрожжевого экстракта обеспечивает дифференциацию видов кишечных бацилл.

Неферментирующие лактозу микроорганизмы, например Salmonella и Shigella, первоначально вызывают пожелтение скошенной части вследствие ферментации небольшого количества глюкозы (декстрозы). После исчерпания глюкозы в аэробных условиях скошенной части реакция становится щелочной: скошенная часть приобретает красный цвет вследствие окисления образовавшихся кислот. В анаэробных условиях столбика среды обратного изменения реакции не происходит, поэтому столбик остаётся кислым и жёлтым.

Ферментирующие лактозу микроорганизмы образуют жёлтую окраску скошенной части и столбика среды. Большое количество образующихся кислот поддерживает кислую реакцию pH также в аэробных условиях.

Исходная окраска среды указывает на отсутствие ферментации глюкозы (декстрозы) и лактозы.

Сочетание сульфата железа и тиосульфата натрия позволяет выявлять образование сероводорода. Образование H₂S определяется по чёрной окраске, распространяющейся по столбику среды, или по чёрному кольцу в верхней части столбика.

Газообразование, или аэрогенная реакция, выявляют по отдельным пузырькам, расслоению среды, её смещению или образованию трещин в столбике агара.

Среда позволяет дифференцировать лактозоферментирующие микроорганизмы от нелактозоферментирующих, включая дифференциацию Salmonella Typhi от других представителей рода Salmonella, а также Salmonella Paratyphi A от Salmonella Scottmuelleri и Salmonella Enteritidis.

Тип образца

• Выделенные микроорганизмы из клинических образцов.
• Выделенные микроорганизмы из пищевых образцов.
• Выделенные микроорганизмы из молочных образцов.
• Выделенные микроорганизмы из водных образцов.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Тип продукта: стерильная среда агара Клиглера железного на скошенной поверхности.
• Форма поставки: стеклянная пробирка со скошенной средой.
• Объём среды в пробирке: 8 мл.
• Окраска среды: красная скошенная поверхность.
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• Контрольный диапазон pH: 7,20–7,60.
• Назначение: дифференциальная идентификация грамотрицательных кишечных бацилл.
• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.