HiMedia SL032-10SL Среда агара Клиглера железного

Питательная дифференциальная среда HiMedia SL032-10SL Среда агара Клиглера железного — стерильный скошенный агар в стеклянной пробирке. Среда предназначена для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных палочек по ферментации декстрозы, лактозы и образованию H₂S, при хранении после получения при 2–8 °C.

Назначение

Среда используется для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных палочек на основании:

• ферментации декстрозы;
• ферментации лактозы;
• образования сероводорода (H₂S).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Методика применения

1. Асептически нанесите исследуемый инокулят штрихом на скошенную часть среды.
2. Инкубируйте скошенные среды при соответствующих условиях.
3. Инкубируйте посевы при 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Для инокуляции следует использовать прямую бактериологическую петлю. Для получения достоверных результатов применяют чистые изоляты.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар Клиглера железный представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца, описанной Клиглером (1, 2), и агара Рассела с двумя сахарами (3). Среда применяется как дифференциальная для тифозных, дизентерийных и родственных кишечных палочек (4).

Бейли и Лейси заменили ранее использовавшийся индикатор Андраде на феноловый красный в качестве индикатора pH (4). Агар Клиглера железный позволяет отличать ферментирующие лактозу микроорганизмы от неферментирующих, а также дифференцировать Salmonella Typhi от других представителей рода Salmonella, Salmonella Paratyphi A от Salmonella Scottmuelleri и Salmonella Enteritidis (5).

Ферментация декстрозы приводит к образованию кислоты, из-за чего индикатор меняет цвет с красного на жёлтый. Поскольку содержание сахара, то есть декстрозы, невелико, образование кислоты ограничено. Поэтому на поверхности среды происходит повторное окисление индикатора, и индикатор сохраняет красный цвет.

При ферментации лактозы образуется большое количество кислоты, препятствующее повторному окислению индикатора, поэтому вся среда становится жёлтой. В дополнение к пептону, пептону HM B и дрожжевому экстракту агар Клиглера железный содержит лактозу и глюкозу (декстрозу), что обеспечивает дифференциацию видов кишечных палочек.

Феноловый красный является индикатором pH и меняет цвет в ответ на образование кислоты при ферментации сахаров. Сочетание сульфата железа и тиосульфата натрия позволяет выявлять образование сероводорода. Образование H₂S проявляется чёрным окрашиванием по всему столбику среды либо в виде кольца вблизи верхней части столбика.

Микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, например Salmonella и Shigella, первоначально формируют жёлтую скошенную часть вследствие образования кислоты при ферментации небольшого количества глюкозы (декстрозы). После исчерпания запаса глюкозы (декстрозы) в аэробной среде скошенной части реакция становится щелочной: скошенная часть приобретает красный цвет из-за окисления образовавшихся кислот. В анаэробной среде столбика обратного изменения реакции не происходит, поэтому столбик остаётся кислым и жёлтым.

Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, формируют жёлтую скошенную часть и жёлтый столбик вследствие ферментации лактозы. Большое количество образующейся кислоты поддерживает кислый pH в аэробных условиях.

Сохранение исходного цвета среды в пробирке указывает на отсутствие ферментации как глюкозы (декстрозы), так и лактозы. Образование газа, или аэрогенная реакция, выявляют по отдельным пузырькам, расслоению или смещению агара, вызванным образованием трещин в столбике среды.

Чистые культуры предполагаемых микроорганизмов, выделенные на плотных средах, например на агаре МакКонки (M081), висмут-сульфитном агаре (M027), дезоксихолат-цитратном агаре (M065), агаре SS (M108) и других средах, инокулируют на агар Клиглера железный для идентификации.

Тип исследуемого материала

Изолированные микроорганизмы из следующих образцов:

• клинические образцы;
• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• вода.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам (6, 7).

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам (8, 9, 10).

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным стандартам (11).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Результаты следует регистрировать через 18–24 ч. Более поздняя регистрация может привести к ошибочным результатам.
2. Для инокуляции следует использовать прямую бактериологическую петлю.
3. Для исключения ошибочных результатов необходимо использовать чистые изоляты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.