HiMedia SL024L-KT Набор второй линии для туберкулеза (всего 10 косяков) (1 набор)

Набор второй линии для определения чувствительности к противотуберкулёзным препаратам HiMedia SL024L-KT (10 скошенных сред). Применяется для диагностики профиля чувствительности M. tuberculosis к восьми антибиотикам и подбора терапии для пациентов с туберкулёзом.

Принцип метода и интерпретация

Метод основан на корреляции между клиническим ответом на противомикробный агент и результатами тестов на чувствительность in vitro. Набор SL024L позволяет определить паттерн чувствительности возбудителя M. tuberculosis для назначения соответствующей лекарственной терапии.

В диагностике различают два типа резистентности:

• Первичная лекарственная устойчивость: наличие устойчивости к препарату у организма, выделенного от пациента, который ранее не получал противотуберкулёзную терапию (вероятный источник — заражение резистентным штаммом из внешней среды).
• Приобретённая (вторичная) лекарственная устойчивость: развивается, как правило, вследствие несоблюдения режима приёма препаратов.

Область применения и типы образцов

Для анализа используются клинические образцы мокроты. Тест на чувствительность может проводиться двумя способами:

1. Прямой метод: инокуляция непосредственно из перевариваемой и концентрированной макроскопически положительной мокроты. Преимущество — сокращение срока получения результата до 3–4 недель (вместо 5–7 недель при косвенном методе). Метод наиболее эффективен при высокой концентрации микобактерий, однако может быть осложнён избыточным ростом других бактерий, выживших после деконтаминации.
2. Косвенный метод: инокуляция чистой культуры микобактерий, выделенной из клинического образца.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Асептически возьмите петлю роста M. tuberculosis, первичного выделенного на скошенной среде Лёвенштейна-Йенсена (L. J.).
2. Суспендируйте образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в флаконе с винтовой крышкой. Для лучшей гомогенизации и деагрегации клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
3. Гомогенизируйте смесь на вортексе до 10 минут.
4. Перед открытием флакона выдержите суспензию в покое 10 минут.
5. Доведите мутность суспензии до соответствия стандарту МакФарланда 0,5 с помощью физиологического раствора (примерно $1,5 \times 10^8$ КОЕ/мл).
6. Разведите полученную суспензию в пропорции 1:10 000.

Процедура посева

Все работы должны проводиться в боксе биологической безопасности с соблюдением правил работы с культурами микобактерий. Для инокуляции используйте калиброванную петлю или микропипетку.

• Для обработанных образцов мокроты: инокулируйте 10 мкл обработанного образца на скошенные среды.
• Для чистых культур: используйте подготовленный инокулят согласно инструкции по приготовлению.

Контроль качества и интерпретация результатов

Внешний вид

Среды представляют собой гладкие скосы бледно-голубого или зеленоватого цвета. Набор содержит среды с восемью противотуберкулёзными препаратами и две контрольные среды:

• Канамицин
• Амикацин
• Этионамид
• D-циклосерин
• Кларитромицин
• Ципрофлоксацин
• п-Аминосалициловая кислота
• Рифабутин

Культуральные характеристики

Инкубация проводится при температуре 35–37 °C в атмосфере 5–10 % $\text{CO}_2$ в течение 2–4 недель (при необходимости наблюдение может быть продлено до 6–8 недель).

Ограничения метода

1. На среде могут расти некоторые грамположительные контаминанты (например, стрептококки) и грамотрицательные бациллы.
2. Возможен рост некоторых сапрофитов.
3. Протеолитические контаминанты могут вызвать локальное или полное расщепление (переваривание) среды.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для диагностики in vitro.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Все образцы и использованные скосы перед утилизацией должны быть погружены в подходящий дезинфектант (предпочтительно 2 % глутаровый альдегид) минимум на два часа.
• Окончательная утилизация осуществляется путем автоклавирования и/или сжигания.

Хранение и срок годности

После получения хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.