Среда Левенштейна–Йенсена с противотуберкулезными препаратами 2 ряда HiMedia SL024 (10 фл.)

Среда Левенштейна–Йенсена с противотуберкулезными препаратами 2 ряда HiMedia SL024 представляет собой набор из 10 скошенных агаров, содержащих восемь антитуберкулезных агентов и два контрольных образца. Используется для определения чувствительности M. tuberculosis к препаратам второго ряда в клинических и исследовательских лабораториях.

Принцип измерения и интерпретация

Методика основана на корреляции между клиническим ответом на антимикробный препарат и результатами тестирования чувствительности in vitro. Набор позволяет диагностировать паттерн чувствительности возбудителя у пациента для подбора соответствующей схемы лекарственной терапии.

В анализе различают два типа резистентности:

• Первичная лекарственная устойчивость: наличие устойчивости к препарату у организма, выделенного от пациента, который ранее не получал противотуберкулезную терапию (вероятное заражение из внешнего источника устойчивым штаммом).
• Приобретенная (вторичная) лекарственная устойчивость: возникает, в том числе, вследствие несоблюдения режима приема препаратов.

Тест на чувствительность микобактерий может проводиться двумя способами:

1. Прямой тест: инокуляция непосредственно из перевариваемого и концентрированного мазка мокроты (положительного по микроскопии). Преимущество метода — сокращение срока получения результата до 3–4 недель, однако возможны осложнения из-за перерастания выжившими после деконтаминации бактериями.
2. Непрямой тест: инокуляция из чистой культуры микобактерий, выделенной из клинического образца. Срок получения результата может составить от 5 до 7 недель.

Методика проведения анализа

Требования к безопасности и подготовке

Все работы должны выполняться в шкафу биологической безопасности с соблюдением стандартных лабораторных процедур при работе с культурами и образцами микобактерий. Для инокуляции следует использовать калиброванную петлю или микропипетку. Перед утилизацией все образцы и использованные скосы должны быть погружены в подходящий дезинфектант (предпочтительно 2 % глутарансальдегид) минимум на два часа.

Процедура инокуляции

Тест проводится одним из двух способов:

1. Для образцов мокроты: использовать образец, прошедший процесс деконтаминации и концентрирования. Инокулировать 10 мкл обработанного образца на скосы.
2. Для чистых культур: использовать чистую культуру микобактерий, выделенную из клинического образца.

Приготовление инокулята

1. Асептически взять петлю роста M. tuberculosis, первоначально выделенного на скосе среды Левенштейна–Йенсена.
2. Суспендировать образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в бутылке с винтовой крышкой. Для лучшей гомогенизации и деагрегации клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
3. Гомогенизировать смесь на вортексе до 10 минут.
4. Перед открытием бутылки оставить смесь в покое на 10 минут.
5. Довести мутность суспензии до соответствия стандарту МакФарланд 0,5 с помощью физиологического раствора (примерно 1,5 × 10⁸ КОЕ/мл).
6. Развести полученную суспензию в соотношении 1:10 000.

Контроль качества

Внешний вид

Скосы бледно-голубого зеленого цвета, гладкие. Содержат восемь противотуберкулезных препаратов: канамицин, амикацин, этионамид, D-циклосерин, кларитромицин, ципрофлоксацин, п-аминосалициловая кислота, рифабутин, а также два контрольных скоса.

Тест на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в атмосфере 5–10 % CO₂ в течение 2–4 недель (дальнейший рост может наблюдаться в течение 6–8 недель).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.

Состав

Собственная разработка производителя (Proprietary).