HiMedia SL024-1KT Набор второй линии для туберкулеза (всего 10 косяков) (1 набор)

Набор второй линии для определения чувствительности к противотуберкулезным препаратам HiMedia SL024-1KT, содержащий 10 скошенных агаров (8 с антибиотиками и 2 контрольных). Применяется для диагностики профиля чувствительности M. tuberculosis и подбора терапии для пациентов с лекарственной устойчивостью.

Принцип метода и интерпретация

Определение чувствительности основано на корреляции между клиническим ответом на противомикробный препарат и результатами тестирования in vitro. Набор позволяет выявить:

• Первичную лекарственную устойчивость: устойчивость к препарату у организма, выделенного от пациента, который ранее не получал противотуберкулезную терапию.
• Приобретенную (вторичную) лекарственную устойчивость: возникает вследствие несоблюдения режима приема препаратов.

Тестирование может проводиться двумя способами:

1. Прямой метод: инокуляция непосредственно из переваренной и сконцентрированной мокроты с положительным мазком. Позволяет получить результат быстрее (через 3–4 недели), но может быть осложнен разрастанием посторонней флоры.
2. Непрямой метод: инокуляция чистой культуры микобактерий, выделенной из клинического образца. Занимает больше времени (от 5 до 7 недель).

Состав набора

Набор включает 10 скошенных агаров (slants):

• 8 сред с противотуберкулезными агентами: канамицин, амикацин, этионамид, D-циклосерин, кларитромицин, ципрофлоксацин, п-аминосалициловая кислота, рифабутин.
• 2 контрольные среды.

Методика проведения анализа

Общие требования

• Работа должна проводиться в боксе биологической безопасности.
• Для инокуляции использовать калиброванную петлю или микропипетку.
• Все образцы и использованные скосы перед утилизацией должны быть погружены в подходящий дезинфектор (рекомендуется 2 % глутарансальдегид) минимум на два часа.

Процедура инокуляции

В зависимости от типа образца:

1. Образец мокроты: использовать пробу, прошедшую процесс деконтаминации и концентрирования. Инокулировать 10 мкл обработанного образца на скосы.
2. Чистая культура: использовать культуру микобактерий, выделенную из клинического образца.

Подготовка инокулята

1. Асептически взять петлю роста M. tuberculosis (первично выделенную на среде Левенштейна-Йенсена).
2. Суспендировать образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в флаконе с завинчивающейся крышкой. Для лучшей гомогенизации и деагрегации клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
3. Гомогенизировать смесь на вортексе до 10 минут.
4. Оставить смесь в покое на 10 минут перед открытием флакона.
5. Довести мутность суспензии до стандарта МакФарланд 0,5 с помощью физиологического раствора (примерно $1,5 \times 10^8$ КОЕ/мл).
6. Разбавить полученную суспензию в пропорции 1:10 000.

Контроль качества

Внешний вид

Сглаженные скосы бледно-голубого или зеленого цвета.

Стерильность

Проходит критерии контроля стерильности.

Культуральные характеристики

Инкубация проводится при 35–37 °C в атмосфере 5–10 % $\text{CO}_2$ в течение 2–4 недель (дальнейший рост может наблюдаться до 6–8 недель).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.