HiMedia SL023L-KT Набор первой линии для туберкулеза (всего 7 косяков) (1 набор)

Набор первой линии для определения чувствительности к противотуберкулёзным препаратам HiMedia SL023L-KT, содержащий 7 скошенных агаров. Применяется для диагностики профиля чувствительности M. tuberculosis к пяти основным препаратам (изониазид, стрептомицин, этамбутол, рифампицин, пиразинамид) и подбора соответствующей терапии.

Принцип метода и интерпретация

Определение чувствительности основано на корреляции между клиническим ответом на антимикробный агент и результатами тестирования in vitro. Набор позволяет дифференцировать:

• Первичную лекарственную устойчивость: устойчивость организма, выделенного от пациента, который ранее не получал противотуберкулёзную терапию (вероятный источник — заражение резистентным штаммом извне).
• Приобретённую (вторичную) лекарственную устойчивость: развивается, в частности, вследствие несоблюдения режима приёма препаратов.

Область применения и типы образцов

Набор предназначен для использования с клиническими образцами мокроты. Тестирование может быть проведено двумя способами:

1. Прямой тест: инокуляция непосредственно из переваренной и сконцентрированной макроскопически положительной мокроты. Метод позволяет получить результат быстрее (через 3–4 недели), но может быть осложнён избыточным ростом сопутствующей бактериальной флоры, выжившей после деконтаминации.
2. Непрямой тест: инокуляция чистой культуры микобактерий, выделенной из клинического образца. Срок получения результата составляет от 5 до 7 недель.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Асептически взять петлю роста M. tuberculosis, предварительно выделенного на скошенном агаре Лёвенштейном-Йенсена (L. J.).
2. Суспендировать образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в бутылке с винтовой пробкой. Для лучшей гомогенизации и деагрегации клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
3. Гомогенизировать смесь на вортексе до 10 минут.
4. Выдержать закрытую бутылку в течение 10 минут перед открытием.
5. Довести мутность суспензии до соответствия стандарту МакФарланде 0,5 с помощью физиологического раствора (примерно $1,5 \times 10^8$ КОЕ/мл).
6. Развести полученную суспензию в соотношении 1:10 000.

Процедура посева

Все работы следует проводить в боксе биологической безопасности с использованием калиброванной петли или микропипетки.

• Для переработанных образцов мокроты: инокулировать 10 мкл обработанного образца на скошенные среды.
• Для чистых культур: использовать подготовленный разведенный инокулят.

Контроль качества и культуральные характеристики

Внешний вид

Среды представляют собой гладкие скосы бледно-голубого или зеленого цвета в длинных пробирках. Набор включает пять сред с противотуберкулёзными препаратами (изониазид, стрептомицин, этамбутол, рифампицин, пиразинамид) при pH 5,5, а также две контрольные среды.

Культуральный ответ

Инкубация проводится при температуре 35–37 °C в атмосфере 5–10 % $\text{CO}_2$ в течение 2–4 недель (при необходимости наблюдение может быть продолжено до 6–8 недель).

Характеристики контроля:

Ограничения метода

1. На среде возможен рост некоторых грамположительных контаминантов (например, стрептококков) и грамотрицательных бацилл.
2. Возможен рост некоторых сапрофитов.
3. Протеолитические контаминанты могут вызвать локальное или полное переваривание среды.
4. Для окончательного подтверждения результатов необходима дополнительная биохимическая и серологическая идентификация.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: от +2 до +8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат обязательному стерилизованию в автоклаве или сжиганию. Контаминированные материалы должны быть деконтаминированы (рекомендуется 2 % глутаровый альдегид минимум на 2 часа) перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила работы с клиническими образцами и микробиологическими культурами.