HiMedia SL023-KT Набор первой линии для туберкулеза (всего 7 косяков) (1 набор)

Набор первой линии для определения чувствительности к противотуберкулёзным препаратам HiMedia SL023-KT, содержащий 7 скошенных агаров. Применяется для диагностики профиля чувствительности M. tuberculosis к пяти основным препаратам первой линии; включает два контрольных скоса.

Принцип измерения

Метод основан на корреляции между клиническим ответом на противомикробный агент и результатами тестирования чувствительности in vitro. Набор позволяет определить первичную лекарственную устойчивость (у пациентов, не получавших ранее терапию) или приобретённую (вторичную) устойчивость, возникшую, в том числе, вследствие несоблюдения режима приёма препаратов.

Область применения

Набор предназначен для профессионального использования в микробиологических лабораториях для анализа:

• мокроты (после процедуры деконтаминации и концентрирования);
• чистых культур микобактерий, выделенных из клинического материала.

Прямой тест (из мокроты) позволяет получить результат быстрее (через 3–4 недели), чем косвенный тест из чистой культуры (5–7 недель), однако может быть осложнён избыточным ростом других бактерий, выживших после деконтаминации.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Асептически взять петлю роста M. tuberculosis, предварительно выделенного на скосе среды Лёвенштейна-Йенсена (L. J.).
2. Суспендировать образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в флаконе с завинчивающейся крышкой. Для лучшей гомогенизации и декумпирования клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
3. Гомогенизировать смесь на вортексе до 10 минут.
4. Перед открытием флакона выдержать суспензию в состоянии покоя 10 минут.
5. Довести мутность суспензии до стандарта МакФарланда 0,5 с помощью физиологического раствора (примерно $1,5 \times 10^8$ КОЕ/мл).
6. Развести полученную суспензию в пропорции 1:10 000.

Процедура посева

1. Все работы проводить в шкафу биологической безопасности.
2. Для инокуляции использовать калиброванную петлю или микропипетку.
3. Внести 10 мкл обработанного образца (или разведенной суспензии) на скосы.
4. Инкубировать при температуре 35–37 °C в атмосфере 5–10 % $\text{CO}_2$ в течение 2–4 недель (при необходимости наблюдение за ростом продлить до 6–8 недель).

Технические характеристики

• Внешний вид: гладкие скосы бледно-голубого зеленого цвета.
• Состав набора: 5 скосов с противотуберкулёзными препаратами (Изониазид, Стрептомицин, Этамбутол, Рифампицин, Пиразинамид) и 2 контрольных скоса.
• Значение pH: 5,5.
• Условия хранения: от +2 до +8 °C.

Контроль качества и интерпретация

Культуральные характеристики после инкубации при 35–37 °C под 5–10 % $\text{CO}_2$ в течение 2–4 недель:

Ограничения и предостережения

• Возможные помехи: на среде могут расти некоторые грамположительные контаминанты (например, стрептококки), грамотрицательные бациллы и некоторые сапрофиты.
• Протеолиз: протеолитические контаминанты могут вызвать локальное или полное переваривание среды.
• Подтверждение: для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических исследований.
• Безопасность: работа с культурами микобактерий требует строгого соблюдения правил микробиологической безопасности. Все использованные материалы должны быть автоклавированы или подвергнуты воздействию 2 % глутарового альдегида в течение минимум двух часов перед утилизацией.