HiMedia SL023-KT Набор первой линии для туберкулеза (всего 7 косяков) (1 набор)

Набор питательных сред HiMedia SL023-KT Набор первой линии для туберкулеза (всего 7 косяков) (1 набор) предназначен для определения лекарственной чувствительности Mycobacterium tuberculosis и включает пять противотуберкулезных препаратов и два контрольных косяка. Набор применяют для анализа мокроты после деконтаминации и концентрирования или чистой культуры микобактерий, инкубируемой при 35–37 °C в атмосфере с 5–10 % CO₂.

Назначение

HiMedia SL023-KT — набор питательных сред для тестирования чувствительности M. tuberculosis к противотуберкулезным препаратам. Набор содержит семь косяков: пять косяков с противотуберкулезными препаратами и два контрольных косяка.

Тип образца

• Клинический образец: мокрота.

Принцип и интерпретация

Тест основан на корреляции in vitro между клиническим ответом на противомикробный препарат и результатом определения чувствительности с использованием набора SL023. Полученные результаты позволяют определить профиль чувствительности M. tuberculosis у пациента и выбрать соответствующее лечение и лекарственную терапию.

Первичная лекарственная устойчивость M. tuberculosis определяется как устойчивость к противомикробному препарату у микроорганизма, выделенного от пациента, который ранее не получал противотуберкулезную терапию. В таком случае устойчивость выявляется у ранее не леченного пациента, предположительно инфицированного извне устойчивым штаммом M. tuberculosis.

Приобретенная, или вторичная, лекарственная устойчивость в значительной степени обусловлена несоблюдением режима приема препаратов.

Методика проведения теста

Тест на чувствительность микобактерий может выполняться одним из двух способов:

1. Прямой тест — непосредственно из деконтаминированной, переваренной и концентрированной мокроты с положительным результатом микроскопии мазка.
2. Непрямой тест — из чистой культуры микобактерий, выделенной из клинического образца.

Прямой тест обычно выполняют только для образцов, в которых микобактерии выявлены в мазке. Наилучшие результаты получают при наличии большого количества микобактерий.

Преимущество прямого теста заключается в более раннем получении отчета о чувствительности — через 3–4 недели. При непрямом тесте результат может быть получен через 5–7 недель, однако такой вариант чаще осложняется разрастанием других бактерий, переживших процедуру деконтаминации.

Инокуляция

1. Для посева используют либо предварительно деконтаминированную и концентрированную мокроту, либо чистую культуру микобактерий, выделенную из клинического образца.
2. При работе с обработанной пробой инокулируйте 10 мкл подготовленного образца на косяки.
3. Для инокуляции используйте калиброванную петлю или микропипетку.

Подготовка инокулята

1. Асептически отберите петлей часть роста M. tuberculosis, первоначально выделенного на косяке среды Левенштейна—Йенсена (LJ).
2. Суспендируйте образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в бутылке с завинчивающейся крышкой.
3. Для лучшей гомогенизации и предотвращения агрегации клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
4. Дополнительно гомогенизируйте смесь на вихревом смесителе в течение до 10 мин.
5. Оставьте смесь в покое на 10 мин, прежде чем открывать бутылку.
6. С помощью физиологического раствора доведите мутность суспензии до соответствия стандарту Мак-Фарланда 0,5, что соответствует приблизительно 1,5 × 10⁸ КОЕ/мл.
7. Разведите полученную суспензию в соотношении 1:10 000.

Культуральные условия

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в атмосфере с 5–10 % CO₂ в течение 2–4 недель. Дополнительный рост может наблюдаться в течение 6–8 недель.

Контроль качества

Внешний вид

Бледные голубовато-зеленые гладкие косяки, содержащие пять противотуберкулезных препаратов:

• изониазид;
• стрептомицин;
• этамбутол;
• рифампицин;
• пиразинамид.

pH среды с противотуберкулезными препаратами — 5,5; дополнительно предусмотрены два контрольных косяка.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральная реакция

Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 35–37 °C в атмосфере с 5–10 % CO₂ в течение 2–4 недель; дальнейший рост может наблюдаться в течение 6–8 недель.

Ограничения применения

1. На среде могут расти некоторые грамположительные контаминанты, например стрептококки, а также грамотрицательные палочки.
2. На среде могут расти некоторые сапрофиты.
3. Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное разрушение среды.
4. Для подтверждения необходима дополнительная биохимическая и серологическая идентификация.

Требования безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие микробиологические лабораторные практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности могут содержаться в соответствующих паспортах безопасности.

Процедура работы с микобактериями

При работе с культурами и образцами микобактерий соблюдайте надлежащие лабораторные процедуры.

Все работы выполняйте в шкафу биологической безопасности.

Перед утилизацией убедитесь, что все образцы и использованные косяки погружены в подходящее дезинфицирующее средство или, предпочтительно, в 2 % раствор глутарового альдегида минимум на 2 ч.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Хранение и срок годности

• Температура хранения при получении: 2–8 °C.
• Хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда
• Количество косяков: 7
• Количество косяков с противотуберкулезными препаратами: 5
• Количество контрольных косяков: 2
• Противотуберкулезные препараты: изониазид, стрептомицин,