HiMedia SL023-1KT Набор первой линии для туберкулеза (всего 7 косяков) (1 набор)

Набор первой линии для определения чувствительности к противотуберкулезным препаратам HiMedia SL023-1KT (7 скошенных сред). Применяется для диагностики профиля чувствительности M. tuberculosis у пациентов с целью подбора эффективной схемы лекарственной терапии.

Принцип работы и интерпретация

Методика основана на корреляции между клиническим ответом на антимикробный агент и результатами тестов на чувствительность in vitro. Набор позволяет дифференцировать:

• Первичную лекарственную устойчивость: устойчивость организма, выделенного у пациента, который ранее не получал противотуберкулезную терапию (вероятно, заражение из внешнего источника устойчивого штамма).
• Приобретенную (вторичную) лекарственную устойчивость: возникает, в частности, из-за несоблюдения режима приема препаратов.

Область применения и типы образцов

Набор предназначен для профессионального использования в лабораторной диагностике (In Vitro).

• Тип образца: мокрота.
• Методы инокуляции:
  • Прямой тест: инокуляция непосредственно из переваренной и сконцентрированной мокроты (положительный мазок). Преимущество — сокращение срока получения результата до 3–4 недель (вместо 5–7 недель при косвенном методе), однако возможен рост сопутствующей микрофлоры, выжившей после деконтаминации.
  • Косвенный тест: инокуляция чистой культуры Mycobacteria, выделенной из клинического образца.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Асептически взять петлей культуру M. tuberculosis, предварительно выделенную на скошенной среде Левенштейна-Йенсена (L. J.).
2. Суспендировать образец в 1,0 мл стерильной дистиллированной воды в бутылке с завинчивающейся крышкой. Для лучшей гомогенизации и деагрегации клеток рекомендуется использовать стеклянные шарики диаметром 3,0 мм.
3. Гомогенизировать смесь на вортексе до 10 минут.
4. Выдержать закрытую бутылку в течение 10 минут перед открытием.
5. Довести мутность суспензии до соответствия стандарту МакФарланда 0,5 с помощью физиологического раствора (примерно $1,5 \times 10^8$ КОЕ/мл).
6. Развести полученную суспензию в пропорции 1:10 000.

Процедура посева

Все работы должны выполняться в боксе биологической безопасности с использованием калиброванных петель или микропипеток.

• Для обработанных образцов мокроты: инокулировать 10 мкл подготовленного образца на скошенные среды.
• Для чистых культур: использовать подготовленный инокулят согласно инструкции.

Контроль качества и характеристики сред

Среды представляют собой скошенные agar-блоки бледно-голубого зеленого цвета с гладкой поверхностью.

Состав набора

Набор включает 7 скошенных сред:

• 5 сред с противотуберкулезными препаратами (pH 5,5): изониазид, стрептомицин, этамбутол, рифампицин, пиразинамид.
• 2 контрольные среды.

Культуральные характеристики

Инкубация проводится при температуре 35–37 °C в атмосфере с содержанием $\text{CO}_2$ 5–10 % в течение 2–4 недель (в некоторых случаях рост может наблюдаться до 6–8 недель).

Характеристики роста при инкубации при 35–37 °C (5–10 % $\text{CO}_2$):

Ограничения и предостережения

Ограничения метода

1. Возможен рост некоторых грамположительных контаминантов (например, стрептококков) и грамотрицательных бацилл.
2. На среде могут расти некоторые сапрофиты.
3. Протеолитические контаминанты могут вызвать локальный или полный гидролиз среды.
4. Для окончательного подтверждения необходима дополнительная биохимическая и серологическая идентификация.

Меры безопасности

• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила работы с клиническими образцами и культурами микроорганизмов.
• Перед утилизацией все использованные среды и образцы должны быть погружены в подходящий дезинфектант (предпочтительно 2 % глутаровый альдегид) минимум на два часа, после чего подвергнуты автоклавированию или инсинерации.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: от +2 до +8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке. Наилучшие показатели эффективности достигаются при использовании в пределах stated expiry period.