Среда скошенная яичная кислая с пируватом HiMedia SL009-25SL (25 фл.)

Питательная скошенная яичная среда Среда скошенная яичная кислая с пируватом HiMedia SL009-25SL (25 фл.) производства HiMedia предназначена для культивирования Mycobacterium tuberculosis и содержит натрия пируват. Среда применяется для посева деконтаминированных концентрированных образцов мокроты или чистых культур микобактерий с последующей инкубацией при 35–37 °C и еженедельным контролем до 8 недель.

Назначение

Среда предназначена для культивирования Mycobacterium tuberculosis. Дополнительно яичная среда может применяться для выращивания широкого спектра Mycobacteria и проведения теста на ниациназу.

Набор содержит 25 готовых скошенных питательных сред во флаконах. Минимальный объём поставки: 10 наборов, 250 пробирок.

Состав

Состав среды по данным производителя:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

В описании поставки также указана среда Левенштейна–Йенсена с пируватом в концентрации 0,3 %, противотуберкулёзным препаратом и следующими компонентами:

• Дигидрофосфат калия: 11,40 г/л
• Гидрофосфат натрия: 6,00 г/л
• Пируват натрия: 3,00 г/л
• Сульфат магния: 0,30 г/л
• Малахитовый зелёный: 0,125 г/л
• Эмульсия яйца: 1000,00 мл
• Бензилпенициллин: 100 000 ед.

Принцип действия и интерпретация

Среда Левенштейна–Йенсена приготовлена по модификации Йенсена исходной рецептуры Левенштейна. Яичная основа поддерживает рост широкого спектра микобактерий и может использоваться для тестирования на ниацин.

• Глицерин обеспечивает источник жирных кислот.
• Малахитовый зелёный действует как ингибитор и индикатор pH.
• Образование синих зон указывает на снижение pH под действием грамположительных контаминантов, например стрептококков.
• Жёлтые зоны свидетельствуют о разрушении красителя грамотрицательными палочками.
• Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное переваривание среды.

Среда с пируватом усиливает рост M. bovis и ослабленных штаммов M. tuberculosis. По сравнению со средой с глицерином среда с пируватом применяется для выделения труднорастущих и полирезистентных штаммов. Пируват может угнетать рост отдельных микобактерий, в частности M. kansasii, поэтому для полного выделения микобактерий рекомендуется использовать обе среды — с пируватом и с глицерином.

Методика проведения анализа

1. Для клинического образца используйте мокроту, предварительно подвергнутую деконтаминации и концентрированию по стандартной методике.
2. Нанесите на поверхность скошенной среды деконтаминированный концентрированный образец мокроты либо чистую культуру Mycobacteria, выделенную из клинического образца.
3. Инкубируйте скошенные среды при температуре 35–37 °C.
4. Осматривайте скошенные среды один раз в неделю в течение 8 недель.
5. Культуральные характеристики обычно оценивают через 2–4 недели инкубации при 35–37 °C в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 %; дополнительный рост может наблюдаться в течение 8 недель.
6. Для подтверждения идентичности выделенного микроорганизма выполните дальнейшую биохимическую и серологическую идентификацию.

Тип образца

Клинический образец: мокрота.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов необходимо использовать утверждённые методики деконтаминации и выделения микобактерий.

При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности и правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. Перед вскрытием упаковки изучите маркировку. Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают через 2–4 недели при 35–37 °C и концентрации CO₂ 5–10 %; дополнительный рост может наблюдаться до 8 недель.

Контроль качества

Внешний вид

Скошенная часть среды: бледная голубовато-зелёная, непрозрачная, с гладкой поверхностью.

Для поставляемого продукта также указана светлая синевато-зелёная окраска косяков, опалесцирующая гладкая поверхность.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Ограничения применения

• На среде могут расти отдельные грамположительные контаминанты, например стрептококки, и грамотрицательные палочки.
• На среде могут расти отдельные сапрофиты.
• Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное переваривание среды.
• Для подтверждения необходимы дальнейшая биохимическая и серологическая идентификация.
• Пируват может угнетать рост некоторых микобактерий, включая M. kansasii; для повышения полноты выделения рекомендуется параллельный посев на среды с пируватом и с глицерином.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: +2…+8 °C.
• Срок годности: 1 год с даты производства.
• После получения продукт следует хранить при температуре +2…+8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания. Лабораторные процедуры обращения с инфекционными материалами должны соблюдаться во время утилизации. Материалы, контактировавшие с клиническим образцом, необходимо деконтаминировать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки

• 25 готовых скошенных питательных сред.
• Стеклянные флаконы с завинчивающимися крышками.

Регистрационные данные

• Регистрационный документ: ФСЗ 2009/03709.
• Назначение изделия: среда.
• Зарегистрировано в Росздравнадзоре.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от среды с глицерином, состав SL009 содержит пируват натрия и применяется для выделения труднорастущих и полирезистентных штаммов, однако пируват может подавлять рост отдельных видов микобактерий, поэтому для комплексного исследования используют обе разновидности среды.