Набор для обнаружения бета-лактамаз расширенного спектра, цефотаксим и клавулан. кислота HiMedia SD238-10СТ (30 мкг + 10 мкг)

Набор для обнаружения бета-лактамаз расширенного спектра, цефотаксим и клавулан. кислота HiMedia SD238-10СТ (30 мкг + 10 мкг) — набор дисков для фенотипического выявления продукции БЛРС методом двойных дисков. Набор применяют для подтверждения устойчивости энтеробактерий к β-лактамным антибиотикам по расширению зоны подавления роста в присутствии клавулановой кислоты; анализ проводят на агаре Мюллера—Хинтона или методом микроразведений в бульоне.

Назначение и область применения

Набор предназначен для идентификации продуцентов бета-лактамаз расширенного спектра действия (БЛРС, ESBL) методом двойных дисков и подтверждения устойчивости штаммов энтеробактерий к антибиотикам.

Диски применяют для тестирования штаммов, которые могут быть устойчивыми, умеренно устойчивыми или чувствительными к следующим группам и препаратам:

• цефалоспорины III и IV поколений, включая цефтазидим, цефотаксим и цефтриаксон;
• монобактамы, включая азтреонам.

БЛРС не влияют на устойчивость к цефамицинам, включая цефокситин и цефотетан, а также к карбапенемам, включая меропенем и имипенем.

Бета-лактамазы расширенного спектра сложно обнаружить, поскольку разные ферменты обладают различной активностью в отношении отдельных цефалоспоринов. Поэтому выбор антимикробных средств для тестирования имеет существенное значение.

Принцип обнаружения БЛРС

Метод основан на выявлении продукции бета-лактамаз расширенного спектра по расширению зоны подавления роста вокруг диска с цефалоспорином III поколения в направлении диска, содержащего клавулановую кислоту.

Синергизм определяется в зоне пересечения диффузионных зон двух дисков, расположенных на небольшом расстоянии друг от друга. Зона подавления роста вокруг диска с цефалоспорином III поколения приобретает вытянутую форму в сторону диска с амоксициллином/клавуланатом вследствие дополнительного подавления роста микроорганизма в участке, куда одновременно диффундируют клавуланат и цефалоспорин III поколения.

Антибиотикочувствительные диски используют для определения эффективности антибиотика в отношении микроорганизма как ориентира для выбора антибиотикотерапии. Диск содержит заданную концентрацию антибиотика в мкг; диск тестируют с микроорганизмом стандартной плотности, равномерно нанесённым на подходящую питательную среду, после инкубации в течение ночи.

Методика проведения анализа

1. Исследуемую культуру равномерно наносят на подходящую питательную среду с использованием микроорганизма стандартной плотности.
2. На поверхность среды помещают диски с цефотаксимом и цефотаксимом в комбинации с клавулановой кислотой. Диски располагают на небольшом расстоянии друг от друга для оценки синергизма в зоне диффузии препаратов.
3. Проводят инкубацию в течение ночи.
4. Измеряют зоны подавления роста вокруг дисков.
5. Результат считают положительным, если различие между зонами подавления роста получено хотя бы для одной пары дисков.
6. При наличии расширения или вытягивания зоны подавления роста в сторону диска с клавулановой кислотой делают вывод о продукции БЛРС.

Анализ проводят одним из следующих способов:

• на агаре Мюллера—Хинтона M173/M1084;
• методом микроразведений в бульоне M011.

Контрольные штаммы

Параллельно с исследованием культур тестируют контрольные штаммы:

• отрицательный контроль: E. coli ATCC 25922, не продуцирующий БЛРС;
• положительный контроль: Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, продуцирующий БЛРС.

Критерии интерпретации результатов

Для потенциально продуцирующих БЛРС изолятов K. pneumoniae, K. oxytoca или E. coli фенотипическое подтверждение проводят с применением цефотаксима и цефтазидима — отдельно и в комбинации с клавулановой кислотой.

Для указанных изолятов ориентируются на следующие значения зон подавления роста:

• цефподоксим, 10 мкг: <17 мм;
• цефтазидим, 30 мкг: <22 мм;
• азтреонам, 30 мкг: <27 мм;
• цефотаксим, 30 мкг: <27 мм;
• цефтриаксон, 30 мкг: <25 мм.

Для других изолятов семейства Enterobacteriaceae, включая Salmonella spp. и P. mirabilis, а также для изолятов P. aeruginosa, приведены следующие критерии зон подавления роста:

• цефподоксим, 10 мкг: <22 мм;
• цефтазидим, 30 мкг: <22 мм;
• цефотаксим, 30 мкг: <27 мм.

Независимо от абсолютных значений диаметров зон подавления роста штаммы, продуцирующие БЛРС, рассматривают как устойчивые ко всем пенициллинам, цефалоспоринам и монобактамам.

Если выделенный изолят оказался продуцентом БЛРС, его считают устойчивым ко всем пенициллинам, цефалоспоринам и азтреонаму.

Состав набора

Каждый диск имеет буквенную кодировку и содержит обозначенную концентрацию препарата.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель: SD238-10СТ
• Назначение изделия: индикатор
• Метод обнаружения: метод двойных дисков
• Исследуемый показатель: продукция бета-лактамаз расширенного спектра
• Цефотаксим, SD040: 30 мкг/диск
• Цефотаксим/клавулановая кислота, SD724: 30/10 мкг/диск
• Количество дисков с цефотаксимом: 3 картриджа по 50 дисков
• Количество дисков с цефотаксимом/клавулановой кислотой: 3 картриджа по 50 дисков
• Питательная среда: агар Мюллера—Хинтона M173/M1084
• Альтернативный метод: микроразведения в бульоне M011
• Условия хранения: −20…+8 °C, в сухом месте, включая эксикатор
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке
• Срок годности: не менее 1 года с даты производства
• Регистрационный статус: зарегистрировано в Росздравнадзоре

Условия хранения и обращения

Набор хранят при температуре −20…+8 °C в сухом месте, включая эксикатор. Диски используют до даты, указанной на этикетке.verter