Реагент (B) Баритта для теста Фогеса-Проскауэра HiMedia R030 (100 мл)

Реагент (B) Баритта для теста Фогеса—Проскауэра HiMedia R030 (100 мл) — раствор для выявления образования ацетоина бактериальными культурами. Реагент применяют для биохимической идентификации представителей семейств Enterobacteriaceae и Vibrionaceae, а также спорообразующих аэробных бактерий; положительная реакция сопровождается образованием розово-красного или вишнёво-красного окрашивания.

Назначение

Реагент Баритта (B) HiMedia R030 используют как индикатор в тесте Фогеса—Проскауэра для обнаружения ацетоина — продукта анаэробного превращения глюкозы. Метод применяют при идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae; в исходном описании также указано применение для представителей Vibrionaceae и спорообразующих аэробных бактерий.

Принцип реакции

При культивировании выделенной культуры на среде Кларка или в пептон-глюкозном бульоне MR-VP (M070) может накапливаться ацетоин, также называемый ацетилметилкарбинолом.

МР-положительные организмы продолжают декарбоксилировать глюкозу с образованием кислот, концентрация которых превышает буферную ёмкость среды; значение pH снижается до 4,2 или ниже. МР-отрицательные организмы ферментируют глюкозу с образованием нейтрального вещества ацетилметилкарбинола (ацетоина), что повышает pH до 6,0 или выше.

В присутствии атмосферного кислорода и щёлочи ацетоин и 2,3-бутандиол окисляются до диацетила. Диацетил реагирует с креатином с образованием продуктов красного цвета. Появление розового, вишнёво-красного или красного окрашивания рассматривается как положительная реакция на образование ацетоина; отсутствие красного окрашивания — как отрицательная реакция.

Методика проведения теста Фогеса—Проскауэра

Процедура по оригинальному описанию

1. Выделенную культуру подращивают на пептон-глюкозном бульоне MR-VP (M070).
2. На 10 мл среды добавляют 0,2 мл (2 капли) реагента A (R029) и 0,2 мл (2 капли) реагента B (R030).
3. Пробирку осторожно встряхивают для поступления кислорода, необходимого для реакции окисления ацетоина.
4. Выдерживают пробу не менее 15 мин, чтобы исключить ложноположительный результат теста.
5. Оценивают появление розового или красного окрашивания среды.

Процедура биохимической идентификации по данным производителя

1. Используют культуры возрастом 24–48 ч, выращенные на среде MR-VP (M070).
2. К культуре добавляют 0,6 мл реагента Баритта, часть A (R029).
3. Добавляют 0,2 мл реагента Баритта, часть B (R030).
4. Оценивают цвет реакции: образование вишнёво-красного окрашивания соответствует положительному результату, отсутствие красного окрашивания — отрицательному.

Контрольные культуры

• Enterobacter aerogenes ATCC 13048: положительная реакция, образование вишнёво-красного окрашивания.
• Escherichia coli ATCC 25922: отрицательная реакция, отсутствие красного окрашивания.

Технические характеристики

• Наименование: реагент (B) Баритта для теста Фогеса—Проскауэра
• Модель: R030
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: индикатор
• Объём: 100 мл
• Форма выпуска: раствор
• Флакон: тёмное стекло
• Внешний вид: бесцветный, прозрачный раствор
• Осадок: отсутствует
• Среда для выращивания культуры: пептон-глюкозный бульон MR-VP (M070)
• Объём реагента B по оригинальной процедуре: 0,2 мл (2 капли) на 10 мл среды
• Объём реагента B по процедуре производителя: 0,2 мл на культуру объёмом с процедурным добавлением 0,6 мл реагента A
• Время выдержки по оригинальной процедуре: не менее 15 мин
• Возраст культуры по процедуре производителя: 24–48 ч
• Положительная реакция: розовое, красное или вишнёво-красное окрашивание
• Отрицательная реакция: отсутствие красного окрашивания

Состав

• Калия гидрохлорид: 40 г
• Дистиллированная вода: 100 мл

Условия хранения и обращения

• Температура хранения: ниже +10…30 °C
• Условия хранения: плотно закрытым, в месте, защищённом от прямых солнечных лучей
• Срок использования: до даты срока годности, указанной на этикетке
• Состояние раствора перед применением: бесцветный, прозрачный, без осадка

Регистрационные сведения

Зарегистрировано в Росздравнадзоре.