Реагент (A) Баритта для теста Фогеса-Проскауэр HiMedia R029 (100 мл)

Реагент (A) Баритта для теста Фогеса—Проскауэра HiMedia R029 (100 мл) — индикаторный реагент для выявления продукции ацетоина бактериальными культурами, поставляемый во флаконе из тёмного стекла объёмом 100 мл. Применяется для идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae и Vibrionaceae, а также спорообразующих аэробных бактерий; результат реакции оценивают по образованию розового или вишнёво-красного окрашивания.

Назначение

Реагент Баритта (α-нафтол) используется в тесте Фогеса—Проскауэра для обнаружения ацетоина — продукта анаэробного превращения глюкозы бактериальными культурами. Тест применяют при биохимической идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae, а также для обнаружения ацетоина у других исследуемых микроорганизмов.

Принцип реакции

При культивировании бактерий на среде Кларка накапливается ацетоин, также называемый ацетилметилкарбинолом. После добавления реагента (A) Баритта и реагента (B) R030 в щелочной среде в присутствии атмосферного кислорода ацетоин и 2,3-бутандиол окисляются до диацетила. Диацетил реагирует с креатином с образованием окрашенных продуктов.

Положительный результат теста проявляется розовым или вишнёво-красным окрашиванием среды. Отрицательный результат характеризуется отсутствием красного окрашивания.

Методика проведения анализа

Подготовка культуры

1. Выделенную бактериальную культуру подращивают на пептон-глюкозном бульоне MR-VP (M070).
2. Для процедуры, описанной производителем, используют культуры возрастом 24–48 ч, выращенные в среде MR-VP (M070).

Проведение теста

1. Для 10 мл среды добавляют 0,2 мл (2 капли) реагента (A) и 0,2 мл (2 капли) реагента (B) R030.
2. В процедуре для культур возрастом 24–48 ч добавляют 0,6 мл реагента Баритта (часть A, R029) и 0,2 мл реагента Баритта (часть B, R030).
3. Осторожно встряхивают пробирку для поступления кислорода, необходимого для реакции окисления ацетоина.
4. Выдерживают реакционную смесь не менее 15 мин, чтобы исключить ложноположительный результат теста.
5. Оценивают образование окрашивания: для положительной реакции характерно образование вишнёво-красного цвета, для отрицательной — отсутствие красного окрашивания.

Контрольные культуры

• Enterobacter aerogenes ATCC 13048: положительная реакция, образование вишнёво-красного окрашивания.
• Escherichia coli ATCC 25922: отрицательная реакция, отсутствие красного окрашивания.

Интерпретация теста Фогеса—Проскауэра

МР-положительные организмы продолжают декарбоксилировать глюкозу с образованием кислот, концентрация которых превышает буферную ёмкость среды; значение pH снижается до 4,2 или ниже.

МР-отрицательные организмы ферментируют глюкозу с образованием нейтрального вещества ацетилметилкарбинола (ацетоина), что повышает значение pH до 6,0 или выше. В щелочной среде и присутствии атмосферного кислорода ацетоин окисляется до диацетила, который реагирует с креатином с образованием продуктов красного цвета.

Состав

• α-нафтол: 5 г
• Этиловый спирт: 100 мл

Технические характеристики

• Наименование: реагент (A) Баритта для теста Фогеса—Проскауэра
• Артикул: R029
• Производитель: HiMedia
• Объём: 100 мл
• Назначение изделия: индикатор
• Определяемый показатель: продукция ацетоина
• Метод анализа: тест Фогеса—Проскауэра
• Исследуемые микроорганизмы: бактерии семейства Enterobacteriaceae и Vibrionaceae, а также спорообразующие аэробные бактерии
• Форма выпуска: раствор во флаконе из тёмного стекла
• Цвет раствора: от бесцветного до красно-коричневого
• Прозрачность: прозрачный
• Осадок: отсутствует
• Сертификат: ФСЗ 2008/01440

Условия хранения и использования

• Температура хранения: ниже +10…30 °C
• Условия хранения: плотно закрытым, в месте, защищённом от прямых солнечных лучей
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Регистрационный статус: зарегистрировано в Росздравнадзоре

Совместимые компоненты методики

• Пептон-глюкозный бульон MR-VP (M070) — среда для выращивания исследуемой культуры.
• Реагент (B) Баритта R030 — добавляется совместно с реагентом (A) при проведении теста Фогеса—Проскауэра.