Раствор альфа-нафтиламина для выявления нитратредуктазной активности HiMedia R009-100ML (100 мл)

Реактив HiMedia R009-100ML (100 мл) — раствор альфа-нафтиламина для выявления нитратредуктазной активности, образующий розово-красное окрашивание при восстановлении нитрата до нитрита. HiMedia R009-100ML применяется совместно с сульфаниловой кислотой для колориметрического определения нитратредуцирующих бактериальных штаммов и хранится при температуре 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение

Раствор альфа-нафтиламина HiMedia R009-100ML предназначен для выявления нитратредуктазной активности бактериальных штаммов и определения восстановления нитрата до нитрита. В структурных характеристиках изделия назначение указано как «краситель».

Реагент применяют совместно с сульфаниловой кислотой |R015|, нитратными дисками |DD041| и для проведения нитратного теста на индол-нитратной среде |M364|.

Принцип реакции

Нитратредуктазопродуцирующие микроорганизмы восстанавливают нитрат до нитрита. Процесс обычно протекает в анаэробных условиях в рамках нитратного дыхания; при наличии подходящего окисляемого субстрата нитратредуктаза катализирует восстановление нитрата до нитрита.

Нитрит реагирует с сульфаниловой кислотой с образованием соли диазония. Соль диазония взаимодействует с α-нафтиламином с образованием водорастворимого азокрасителя красного цвета. Появление розово-красного окрашивания в течение 1–2 мин свидетельствует о восстановлении нитрата до нитрита.

Методика выявления нитратредуктазной активности

1. Проведите нитратный тест на индол-нитратной среде |M364| либо используйте нитратные диски |DD041| в соответствии с применяемой методикой.
2. Добавьте сульфаниловую кислоту |R015|.
3. Добавьте раствор α-нафтиламина HiMedia R009-100ML.
4. Перемешайте реакционную смесь и наблюдайте изменение окраски.
5. Развитие отчётливого розово-красного или красного окрашивания в течение 1–2 мин указывает на восстановление нитрата до нитрита и подтверждает нитратредуктазную активность.
6. Отсутствие изменения окраски расценивается как отрицательная реакция.

Контрольные микроорганизмы

• Acinetobacter calcoaceticus ATCC 43498: отрицательная реакция, отсутствует изменение окраски.
• Enterobacter aerogenes ATCC 13048: положительная реакция, развивается отчётное красное окрашивание.

Состав и внешний вид

• α-Нафтиламин: 5,00 г
• Уксусная кислота 5N: 1000,00 мл
• Внешний вид: прозрачная жидкость светло-розового цвета без посторонних включений
• Запах: характерный запах уксусной кислоты

Раствор представляет собой готовый реактив Грисса на основе α-нафтиламина и ледяной уксусной кислоты без сульфаниловой кислоты; для проведения реакции требуется совместное применение с сульфаниловой кислотой |R015|.

Технические характеристики

• Наименование: раствор альфа-нафтиламина для выявления нитратредуктазной активности
• Модель / артикул: R009-100ML
• Объём: 100 мл
• Форма выпуска: 1 флакон × 100 мл
• Производитель: HiMedia
• Сертификат: ФСЗ 2008/01440
• Назначение изделия: краситель
• Метод анализа: колориметрическая реакция восстановления нитрата до нитрита
• Положительный результат: розово-красное или отчётное красное окрашивание
• Время проявления положительной реакции: 1–2 мин
• Условия хранения: от 10 до 30 °C
• Условия хранения тары: плотно закрытая тара
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке
• Регистрационный статус: зарегистрировано в ФС СЗ

Совместимые реагенты и материалы

• Сульфаниловая кислота: |R015|
• Нитратные диски: |DD041|
• Индол-нитратная среда: |M364|

Ограничения применения

Раствор α-нафтиламина не содержит сульфаниловую кислоту. Для формирования соли диазония и последующего образования красного водорастворимого азокрасителя реагент необходимо применять совместно с сульфаниловой кислотой |R015|.

При отсутствии розово-красного окрашивания в течение 1–2 мин реакцию оценивают как отрицательную; результат интерпретируют с учётом используемой питательной среды, нитратных дисков и методики постановки теста.