HiMedia MV969-500G Триптон-пептон-глюкозно-дрожжевая экстракт HiVeg

Сухая питательная среда HiMedia MV969-500G Триптон-пептон-глюкозно-дрожжевая экстракт HiVeg массой 500 г предназначена для приготовления бульонной основы без трипсина и имеет растительную основу без компонентов животного происхождения. Среда применяется для исследования токсичности культур Clostridium botulinum, выделенных из пищевых образцов, с инкубацией в анаэробных условиях до 7 суток.

Назначение

Среда предназначена для исследования токсичности культур Clostridium botulinum из различных образцов, в частности из пищевых продуктов.

Тип образца: выделенные микроорганизмы из пищевых образцов.

TPGY-бульон — триптон-пептон-глюкозно-дрожжевая среда — сформулирован согласно рекомендациям APHA для определения токсичности культур Clostridium botulinum в пищевых продуктах. В составе MV969-500G пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium botulinum — анаэробная спорообразующая палочковидная бактерия, продуцирующая белок с характерной нейротоксичностью.

Культуры C. botulinum подразделяются на три отдельные группы по свойствам, отличным от типа продуцируемого токсина. Каждая группа включает только штаммы со сходными культуральными и физиологическими характеристиками.

Протеолиз, то есть способность переваривать коагулированный яичный белок или мясо, является одним из дифференцирующих признаков.

Гидролизат HiVeg®™, пептон HiVeg®™ и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами для роста. Декстроза служит ферментируемым углеводом, а тиогликолят натрия — восстановителем. Трипсин активирует токсины непротеолитических типов.

Предположительные культуры C. botulinum непротеолитических типов инокулируют в основу триптон-пептон-глюкозно-дрожжевой среды без трипсина, а протеолитические типы — в варёную среду M (M149).

Приготовление среды

1. Суспендируйте 80,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте приготовленную среду автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. До использования храните стерильную приготовленную среду в холодильнике.
5. Перед инокуляцией при необходимости добавьте 1,5%-ный раствор трипсина, стерилизованный фильтрованием, до конечной концентрации 0,1 %.

Работа с образцами и инкубация

Инокулированные пробирки инкубируют в течение 7 суток, после чего исследуют на наличие токсина.

Если после 7 суток инкубации роста нет, инкубируйте материал дополнительно 10 суток, чтобы обеспечить возможное позднее прорастание спор C. botulinum, прежде чем утилизировать образец.

Токсины непротеолитических типов не достигают максимальной потенциальной токсичности без активации. Поэтому надосадочную жидкость пищевого продукта, жидкий пищевой продукт, TPGY-бульон или культуры на варёном мясе обрабатывают трипсином для активации.

Токсины протеолитических типов не требуют такой активации.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Необходимо использовать хорошо изолированные колонии.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда: прозрачный раствор жёлтого цвета без существенного осадка.

Реакция и pH

Реакция: для водного раствора с концентрацией 8,0 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после инкубации при 26–28 °C в течение до 7 суток.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке и использовании в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухой продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 15–25 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Порошок обладает гигроскопичностью; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер.

Рабочие характеристики продукта сохраняются лучше всего при использовании в пределах указанного срока годности.

Требования безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.

При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Отличие от стандартных пептонных основ

В основе MV969-500G пептоны животного происхождения полностью заменены гидролизатом и пептоном HiVeg®™ растительного происхождения; трипсин не входит в базовую среду и добавляется перед инокуляцией только при необходимости активации токсинов непротеолитических типов.