HiMedia MV871-500G Глюкозная HiVeg среда Хью-Лейфсона

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV871-500G Глюкозная HiVeg среда Хью-Лейфсона предназначена для дифференциации стафилококков и микрококков по анаэробной ферментации глюкозы. HiMedia MV871-500G применяется для идентификации патогенных и галофильных микроорганизмов, а также контроля аэробного и анаэробного расщепления глюкозы; фасовка — 500 г.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации стафилококков и микрококков на основании анаэробной ферментации глюкозы.

Высокая концентрация соли позволяет использовать среду для идентификации патогенных и галофильных микроорганизмов, а также для определения аэробного и анаэробного расщепления глюкозы стафилококками и микрококками.

Состав

Расчётный состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Глюкозная среда Хью—Лейфсона разработана на основе формулы Hugh и Leifson. Среда предназначена для дифференциации стафилококков и микрококков; методика приготовления описана FDA.

Микроорганизмы используют углеводы двумя основными способами:

• ферментация;
• окисление.

Способность микроорганизмов к ферментативному или окислительному метаболизму углеводов может использоваться для дифференциации бактерий. В среде предусмотрена высокая концентрация углевода и низкая концентрация пептона HiVeg®. Это снижает вероятность того, что аэробный микроорганизм будет использовать пептон с образованием щелочной среды, нейтрализующей слабую кислотность, вырабатываемую окислительным микроорганизмом.

Концентрация агара обеспечивает полужидкую консистенцию, позволяющую определять подвижность микроорганизмов, и способствует распределению по пробирке кислоты, образующейся на поверхности среды.

В среде Хью—Лейфсона HiVeg® пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами, что исключает риски, связанные с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.

При образовании кислоты цвет среды изменяется с фиолетового на жёлтый по всей толщине среды. Стафилококки ферментируют глюкозу с образованием кислоты по всей глубине среды как в анаэробной пробирке, герметизированной парафином, так и в аэробной незапечатанной пробирке. Микрококки либо не образуют кислоту ни в одной из пробирок, либо образуют кислоту только в результате окисления в верхней части аэробной пробирки.

Методика приготовления

1. Взвесьте 45,52 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки попарно для проведения аэробной и анаэробной ферментации.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду в пробирках, установленных вертикально.

Типы образцов

• Клинические образцы: мазки из ротовой полости, слизистых оболочек, ротоглотки и верхних дыхательных путей.
• Образцы пищевой продукции и молочных продуктов.

Подготовка образцов и проведение испытания

1. Засейте две пробирки среды — для аэробной и анаэробной ферментации.
2. Выполните посев уколом по всей длине среды с использованием длинной бактериологической петли.
3. Поверхность агара в одной из двух пробирок покройте слоем стерильного жидкого парафина толщиной около 25 мм.
4. Инкубируйте пробирки при 37 °C.
5. Жёлтое окрашивание интерпретируйте как признак образования кислоты из глюкозы.

Для стерилизации жидкого парафина применяйте сухой жар при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением недостаточна для этой цели.

Интерпретация результатов:

• окислительные микроорганизмы образуют кислоту в незапечатанной пробирке; рост при этом слабый или отсутствует, а в запечатанной пробирке образование кислоты отсутствует;
• ферментативные микроорганизмы образуют кислоту и в запечатанной, и в незапечатанной пробирке;
• стафилококки образуют кислоту по всей глубине среды в обеих пробирках;
• микрококки не образуют кислоту ни в одной из пробирок либо образуют её только в верхней части аэробной пробирки.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или голубовато-серый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Полужидкая среда, сопоставимая с 0,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков образуется фиолетовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 4,55%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются