HiMedia MV871-100G Hugh Leifson Glucose HiVeg Medium → Глюкозная HiVeg среда Хью-Лейфсона

Глюкозная HiVeg среда Хью-Лейфсона HiMedia MV871-100G для дифференциации стафилококков и микрококков на основе анаэробного ферментирования глюкозы. Применяется для анализа клинических, пищевых и молочных образцов; содержит высокую концентрацию углеводов и низкое содержание растительного пептона для исключения нейтрализации кислотности аэробными организмами.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана по методике Хью и Лейфсона и соответствует требованиям FDA для дифференциации стафилококков от микрококков. В основе метода лежит определение способности микроорганизмов утилизировать углеводы путём ферментации или окисления.

Среда содержит высокую концентрацию углеводов и низкую концентрацию растительного пептона HiVeg®, что предотвращает возможность использования пептона аэробными организмами с последующим образованием щелочной среды, которая могла бы нейтрализовать слабую кислотность, создаваемую окислительными организмами. Концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению кислоты по всей длине пробирки.

Высокая концентрация солей в составе делает среду подходящей для идентификации патогенных и галофильных организмов, а также для тестирования аэробного и анаэробного расщепления глюкозы. Использование растительных пептонов вместо животных исключает риски возникновения БЭГ/ТГЭ (губчатой энцефалопатии).

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: мазки из полости рта, слизистых оболочек, орофарингеальные мазки, образцы из верхних дыхательных путей.
• Пищевые и молочные продукты.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды: 45,52 г порошка суспендируют в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. Нагревают до кипения для полного растворения.
2. Розлив: Среду разливают по пробиркам в двух экземплярах (для аэробного и анаэробного ферментирования).
3. Стерилизация: Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охлаждение: Пробирки охлаждают в вертикальном положении.
5. Посев: Культуру вносят в две пробирки, прокалывая среду длинной проволочной петлей по всей длине.
6. Создание условий: Поверхность агара в одной из двух пробирок покрывают слоем стерильного жидкого парафина толщиной около 25 мм.
   • Примечание: Жидкий парафин должен быть подвергнут сухой стерилизации при 160–170 °C в течение 2 часов; влажная стерилизация под давлением недостаточна.
7. Инкубация: Инкубируют при 37 °C.

Интерпретация результатов

Положительным результатом считается изменение цвета среды с пурпурного на жёлтый по всему объёму, что указывает на образование кислоты.

• Стафилококки: образуют кислоту путём ферментации во всей толще среды как в анаэробных пробирках (запечатанных парафином), так и в аэробных (открытых).
• Микрококки: либо не образуют кислоту вовсе, либо производят её только путём окисления в верхней части аэробной пробирки.
• Окислительные организмы: производят кислоту в открытой пробирке (при слабом росте или без него), но не производят её в запечатанной пробирке.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• Назначение: для диагностики in vitro, только для профессионального использования.
• Безопасность: использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать стандартные правила работы с клиническими образцами и микробиологическими культурами.
• Утилизация: отработанные среды и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат деконтаминации и утилизации путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами.