HiMedia MV871-100G Hugh Leifson Glucose HiVeg Medium → Глюкозная HiVeg среда Хью-Лейфсона

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV871-100G Hugh Leifson Glucose HiVeg Medium — глюкозная HiVeg среда Хью-Лейфсона для дифференциации стафилококков и микрококков по анаэробной ферментации глюкозы. Среда предназначена для идентификации патогенных и галофильных микроорганизмов, а высокая концентрация хлорида натрия ограничивает применение для некоторых культур.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации стафилококков и микрококков на основании анаэробной ферментации глюкозы.

Высокая концентрация соли позволяет использовать среду для идентификации патогенных и галофильных микроорганизмов, а также для определения аэробного и анаэробного расщепления глюкозы стафилококками и микрококками.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. Пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами HiVeg® для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель и фасовка: MV871-100G
• Назначение изделия: питательная микробиологическая среда
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 100 г
• Конечный pH: 7,4 ± 0,2 при 25 °C
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Гелеобразование: полужидкий гель, сопоставимый с 0,3%-ным агаровым гелем
• Температура хранения сухой среды: 10…30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15…25 °C

Приготовление среды

1. Суспендируйте 45,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки попарно для проведения аэробной и анаэробной ферментации.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа.
5. Охладите среду в пробирках, установленных вертикально.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Хью-Лейфсона разработана для дифференциации стафилококков и микрококков. Метод основан на таксономической значимости ферментативного и окислительного метаболизма углеводов у грамотрицательных кишечных бактерий и применяется для дифференциации ряда бактерий.

Микроорганизмы используют углеводы двумя основными способами:

• ферментация;
• окисление.

Среда содержит высокую концентрацию углевода и низкую концентрацию пептона HiVeg®. Такое соотношение снижает вероятность того, что аэробный микроорганизм будет использовать пептон с образованием щелочной реакции, нейтрализующей слабую кислотность, продуцируемую окислительным микроорганизмом.

Концентрация агара обеспечивает возможность определения подвижности микроорганизмов и способствует распределению кислоты по всей пробирке от поверхности среды вглубь.

Изменение окраски среды с пурпурной на жёлтую во всём объёме указывает на образование кислоты при расщеплении глюкозы.

Стафилококки образуют кислоту в результате ферментации по всей глубине среды — как в анаэробной пробирке, герметизированной парафином, так и в аэробной незапечатанной пробирке.

Микрококки либо не образуют кислоту ни в одной из пробирок, либо образуют кислоту только в результате окисления в верхней части аэробной пробирки.

Типы образцов

• Клинические образцы: мазки из ротовой полости, слизистых оболочек, ротоглотки и верхних дыхательных путей.
• Пищевые и молочные образцы.

Подготовка образцов и проведение анализа

1. Засейте две пробирки среды — для аэробной и анаэробной ферментации.
2. Выполните посев исследуемой культуры уколом длинной бактериологической петлёй по всей длине среды.
3. Поверхность агара в одной пробирке из пары покройте слоем стерильного жидкого парафинового масла толщиной около 25 мм.
4. Вторую пробирку оставьте незапечатанной для оценки аэробной ферментации.
5. Инкубируйте обе пробирки при 37 °C.
6. Жёлтая окраска указывает на образование кислоты из глюкозы.
7. Интерпретируйте результат с учётом окраски среды в аэробной и анаэробной пробирках.

Жидкий парафин, используемый для пробирок, необходимо стерилизовать сухим способом при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением для этой цели недостаточна.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до голубовато-серого цвета.

Гелеобразование

Полужидкий гель, сопоставимый с 0,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,55 % масса/объём при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

pH

7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Храните сухую среду при 10…30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 15…25 °C