HiMedia MV847-500G HiVeg среда для определения подвижности-индола-лизина

Питательная среда HiMedia MV847-500G HiVeg среда для определения подвижности-индола-лизина — сухая порошкообразная среда растительного происхождения с конечным pH 6,6 ± 0,2. Среда предназначена для идентификации представителей Enterobacteriaceae по подвижности, декарбоксилазной и дезаминазной активности лизина, а также продукции индола; масса упаковки — 500 г.

Назначение

Среда для идентификации представителей Enterobacteriaceae по четырём дифференциальным реакциям:

• подвижность;
• декарбоксилирование лизина;
• дезаминирование лизина;
• продукция индола.

Продукт имеет растительную основу и не содержит компонентов животного происхождения.

Состав

Состав на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Профиль продукта

Среда на растительной основе

• Код продукта: MV847
• Пептон HiVeg®
• Гидролизат HiVeg®

Среда на основе компонентов животного происхождения

• Код продукта: M847
• Пептический перевар тканей животного происхождения
• Ферментативный гидролизат казеина

Принцип измерения и интерпретация

Среда MIL HiVeg® является модификацией среды MIL, рецептура которой разработана в соответствии с методикой Reller и Merrett. Полная замена пептона животного происхождения растительными пептонами исключает риски, связанные с BSE/TSE.

Среда позволяет получить четыре дифференциальные реакции в одной пробирке. Для предварительной идентификации представителей Enterobacteriaceae рекомендуется использовать среду совместно с трёхсахарным железным агаром TSI HiVeg® (MV021) и агаровой основой с мочевиной Urea HiVeg® (MV112).

Функции компонентов:

• пептон HiVeg® и гидролизат HiVeg® обеспечивают аминокислотами и другими сложными азотистыми веществами;
• дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B;
• декстроза является источником энергии;
• бромкрезоловый пурпурный — индикатор pH, облегчающий обнаружение декарбоксилазной активности;
• цитрат аммония-железа участвует в обнаружении продуктов окислительного дезаминирования лизина.

При ферментации декстрозы цвет среды изменяется с пурпурного на жёлтый. Кислый pH стимулирует активность ферментов. Образование аминов при разложении аминокислот повышает pH и окрашивает среду в нижней части пробирки в пурпурный цвет. Из-за более высокого содержания кислорода верхняя часть пробирки остаётся кислой и имеет жёлтую окраску.

При окислительном дезаминировании лизина образуется соединение, реагирующее с цитратом аммония-железа с формированием красноватой окраски в верхней части среды.

Посев выполняют уколом, после чего культуры инкубируют при 37 °C в течение 18–24 ч. Реакции подвижности, дезаминирования лизина и декарбоксилирования лизина оценивают до проведения теста на образование индола.

Интерпретация реакций:

• подвижность проявляется диффузным ростом от линии посева;
• неподвижные культуры растут вдоль линии посева;
• дезаминирование лизина выявляют по красной или красно-коричневой окраске верхней части среды;
• декарбоксилирование лизина проявляется пурпурной окраской среды по всей высоте;
• интенсивность пурпурной окраски может различаться; из-за восстановления индикатора окраска может быть светлой;
• для определения продукции индола в среду добавляют 3–4 капли реактива Ковача R008;
• положительная реакция на индол — розовое или красное кольцо.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 36,52 г среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки порциями по 5 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.
6. Выполните посев культуры уколом.
7. Инкубируйте культуры при 37 °C в течение 18–24 ч.
8. Оцените подвижность, дезаминирование лизина и декарбоксилирование лизина.
9. Для определения продукции индола добавьте 3–4 капли реактива Ковача R008 и оцените образование розового или красного кольца.

Нормы приготовления

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Полутвёрдая среда, сопоставимая с 0,2 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

В пробирках в виде столбиков формируется прозрачный гель красновато-пурпурного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 3,65 % масс./об. при 25 °C: pH 6,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.