HiMedia MV847-500G HiVeg среда для определения подвижности-индола-лизина

Сухая питательная среда HiMedia MV847-500G HiVeg для определения подвижности, индола и лизина. Применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae на основании их подвижности, активности лизин-декарбоксилазы, лизин-дезаминазы и продукции индола.

Принцип измерения

Среда MIL HiVeg® является модификацией среды MIL, разработанной по методу Реллера и Мерретта. Она позволяет определить четыре дифференциальные реакции в одной пробирке.

В составе используются растительные пептоны и гидролизаты HiVeg®, которые обеспечивают микроорганизмы аминокислотами и сложными азотистыми веществами, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). Декстроза служит источником энергии. Бромкрезоловый пурпурный выступает в роли индикатора pH для детекции декарбоксилазной активности.

Интерпретация результатов:

• Ферментация декстрозы: цвет среды меняется с пурпурного на жёлтый. Кислая среда стимулирует активность ферментов.
• Декарбоксилирование лизина: расщепление аминокислоты с образованием аминов повышает pH, из-за чего нижняя часть столбика в пробирке снова становится пурпурной.
• Дезаминирование лизина: окислительное дезаминирование приводит к образованию соединения, которое реагирует с цитратом аммония железа(III), окрашивая верхнюю часть среды в красно-коричневый цвет.
• Подвижность: определяется по диффузному росту микроорганизмов от линии посева.
• Продукция индола: определяется путем добавления реагента Ковакса; появление розового или красного кольца указывает на положительную реакцию.

Для первичной идентификации Enterobacteriaceae рекомендуется использовать данную среду совместно с трёхуглеводным железным агаром (TSI) HiVeg® (MV021) и мочевинным агаром HiVeg® (MV112).

Методика проведения анализа

1. Подготовьте среду: суспендируйте 36,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам порциями по 5 мл.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.
6. Выполните посев методом укола (stab-inoculation).
7. Инкубируйте при 37 °C в течение 18–24 часов.
8. Оцените подвижность, дезаминирование и декарбоксилирование лизина.
9. Для проверки продукции индола добавьте в среду 3–4 капли реагента Ковакса (R008).

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,6 $\pm$ 0,2
• Вес нетто: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: растительное (Animal Free)

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ключ к обозначениям:

• Подвижность: (+) положительная реакция, рост в сторону от линии укола; (-) отрицательная реакция, рост строго вдоль линии укола.
• Индол: (+) появление розово-красного кольца после добавления реагента Ковакса; (-) отсутствие кольца.
• Лизин-дезаминаза: (+) красно-коричневое окрашивание в верхней части среды.
• Лизин-декарбоксилаза: (+) пурпурный цвет по всей среде.
• (+): эпизодическая реакция.

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный свободно текущий порошок жёлтого цвета, возможен легкий зеленоватый оттенок.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставим с 0,2 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность: прозрачный гель красно-пурпурного цвета (в столбике пробирки).
• Реакция: 3,65 % (масса/объем) водный раствор имеет pH 6,6 $\pm$ 0,2 при 25 °C.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Температура использования: 10–30 °C.