HiMedia MV847-100G Motility-Indole-Lysine HiVeg Medium → HiVeg среда для определения подвижности-индола-лизина

HiVeg среда для определения подвижности-индола-лизина HiMedia MV847-100G на растительной основе. Используется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae на основании их подвижности, продукции индола, а также активности лизин-декарбоксилазы и лизин-дезаминазы.

Принцип измерения

Среда MV847 является модификацией среды MIL (по Reller и Merrett), в которой животные пептоны полностью заменены растительными, что исключает риски заражения BSE/TSE. В одной пробирке реализуются четыре дифференциальные реакции:

1. Подвижность: определяется по диффузному росту микроорганизмов от линии посева.
2. Лизин-декарбоксилаза: ферментативное расщепление лизина приводит к повышению pH, из-за чего среда в нижней части пробирки (столбике) окрашивается в пурпурный цвет.
3. Лизин-дезаминаза: окислительное дезаминирование лизина приводит к образованию соединения, которое реагирует с цитратом аммония-железа, окрашивая верхнюю часть среды в красный или красно-коричневый цвет.
4. Продукция индола: определяется путем добавления реагента Ковакса после инкубации.

Декстроза служит источником энергии; её ферментация приводит к закислению среды и изменению цвета с пурпурного на жёлтый. Бромкрезоловый пурпурный выступает в роли pH-индикатора. Для первичной идентификации Enterobacteriaceae рекомендуется использовать данную среду совместно с трёхсахарным железным агаром (TSI) HiVeg (MV021) и агаром с мочевиной HiVeg (MV112).

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: суспендируйте 36,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагрейте до кипения для полного растворения.
2. Розлив: разлейте среду по пробиркам по 5 мл.
3. Стерилизация: автоклавируйте при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охлаждение: охлаждайте пробирки в вертикальном положении.
5. Посев: выполните укольный посев культуры.
6. Инкубация: инкубируйте при 37 °C в течение 18–24 часов.
7. Интерпретация результатов:
   • Подвижность: положительная (+) — диффузный рост; отрицательная (−) — рост строго по линии укола.
   • Лизин-дезаминаза: положительная (+) — красный или красно-коричневый цвет в верхней части среды.
   • Лизин-декарбоксилаза: положительная (+) — пурпурный цвет по всей высоте среды (интенсивность может варьироваться).
   • Индол: добавьте 3–4 капли реагента Ковакса (R008). Положительная реакция (+) — появление розового или красного кольца.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Реконституция (приготовление)

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ключ к интерпретации:

• Подвижность: + = положительная реакция (рост в сторону от линии укола); - = отрицательная реакция (рост вдоль линии укола).
• Индол: + = розово-красное кольцо после добавления реагента Ковакса; - = отсутствие кольца.
• Лизин-дезаминаза: + = красно-коричневая реакция в верхней части среды.
• Лизин-декарбоксилаза: + = пурпурный цвет среды.
• (+) = эпизодическая реакция.

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный, сыпучий порошок жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставим с 0,2% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: в пробирках формируется прозрачный гель красно-пурпурного цвета.
• Реакция: водный раствор (3,65% масс./об.) имеет pH 6,6 $\pm$ 0,2 при 25 °C.

Условия эксплуатации и хранения

• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 минут.
• Хранение сухого продукта: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.