HiMedia MV847-100G Motility-Indole-Lysine HiVeg Medium → HiVeg среда для определения подвижности-индола-лизина

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV847-100G HiVeg для определения подвижности, индола и лизина имеет растительную основу и не содержит компонентов животного происхождения. Среда применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae по подвижности, декарбоксилированию и дезаминированию лизина, а также продукции индола; фасовка — 100 г.

Назначение

Среда предназначена для идентификации представителей Enterobacteriaceae по следующим признакам:

• подвижность;
• декарбоксилазная активность по лизину;
• дезаминазная активность по лизину;
• продукция индола.

Среда обеспечивает определение четырёх дифференциальных реакций в одной пробирке. Продукт на растительной основе MV847 является альтернативой среде M847 на основе компонентов животного происхождения.

Состав

Конечное значение pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Профиль продукта

Растительная основа

• Код: MV847
• Пептон HiVeg®
• Гидролизат HiVeg®

Основа животного происхождения

• Код: M847
• Пептический перевар тканей животного происхождения
• Ферментативный гидролизат казеина

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда приготовлена с полной заменой пептона животного происхождения на растительные пептоны, поэтому не содержит рисков, связанных с BSE/TSE. MIL HiVeg® Medium является модификацией MIL Medium, сформулированной в соответствии с методикой Reller и Merrett.

Пептон HiVeg® и гидролизат HiVeg® обеспечивают поступление аминокислот и других сложных азотистых веществ. Дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B. Декстроза является источником энергии. Бромкрезоловый пурпурный — индикатор pH, используемый для выявления декарбоксилазной активности.

В результате ферментации декстрозы цвет среды изменяется с пурпурного на жёлтый. Кислая реакция среды стимулирует активность ферментов. Образование аминов при разложении аминокислот повышает pH и окрашивает среду в нижней части пробирки в пурпурный цвет. Из-за более высокого содержания кислорода верхняя часть пробирки остаётся кислой и имеет жёлтую окраску.

Окислительное дезаминирование лизина приводит к образованию соединения, которое реагирует с цитратом аммония железа с появлением красной окраски в верхней части среды.

Посевы выполняют уколом и инкубируют при 37 °C в течение 18–24 ч. Реакции подвижности, дезаминирования лизина и декарбоксилирования лизина оценивают до проверки реакции на индол.

• Подвижность проявляется диффузным ростом от линии посева.
• Неподвижные культуры растут вдоль линии посева.
• Дезаминирование лизина определяется по красной или красно-коричневой окраске в верхней части среды.
• Декарбоксилирование лизина проявляется пурпурной окраской по всему объёму среды.
• Интенсивность пурпурной окраски может различаться; из-за восстановления индикатора окраска иногда бывает светлой.
• Для определения продукции индола в среду добавляют 3–4 капли реактива Ковача R008.
• Положительная реакция на индол проявляется появлением розового или красного кольца.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 36,52 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки по 5 мл.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Восстановление и объём приготовления

Стерилизация

Режим стерилизации: 121 °C, 15 мин.

Добавки

Дополнительные добавки: отсутствуют.

Условия хранения

• Сухая среда: при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленная среда: при 2–8 °C.
• Температурный диапазон, указанный для карточки товара: 10–30 °C.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет порошка: жёлтый, допускается слегка зеленоватый оттенок.

Состояние: однородный, сыпучий порошок без комков.

Желирование

Среда: полужидкая, сопоставимая с 0,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

В пробирках скошенные части среды образуют прозрачный гель красно-пурпурного цвета.

Реакция среды

Реакция 3,65%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения результатов

• Подвижность: + — положительная реакция, рост за пределами линии посева.
• Подвижность: − — отрицательная реакция, рост вдоль линии посева.
• Индол: + — розово-красное кольцо после добавления реактива Ковача.
• Индол: − — отсутствие розового или красного кольца после добавления реактива Ковача.
• Дезаминаза лизина: + — красно-коричневая окраска в верхней части среды.
• Декарбоксилаза лизина: + — пурпурная окраска.
• (+) — периодически наблюдаемая реакция.

Совместимость с другими средами

Для первичной идентификации представителей Enterobacteriaceae рекомендуется использовать среду совместно со следующими продуктами:

• трёхсахарным железным агаром HiVeg® (TSI) MV021;
• агаром-основой HiVeg® с мочевиной MV112.

Технические характеристики