Питательная среда HiMedia MV826-500G HiVeg среда Хью-Лейфсона — порошкообразная среда на растительной основе для выявления аэробного и анаэробного расщепления глюкозы. Среда применяется для анализа пищевых и молочных образцов; для подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Среда Хью—Лейфсона HiVeg предназначена для выявления аэробного и анаэробного расщепления глюкозы микроорганизмами и дифференциации некоторых бактерий по окислительному и ферментативному метаболизму углеводов.

Тип образца: пищевые и молочные образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров работы среды.

Принцип действия и интерпретация

Среда Хью—Лейфсона разработана Hugh и Leifson для оценки таксономической значимости ферментативного и окислительного метаболизма углеводов у грамотрицательных кишечных бактерий.

Микроорганизмы используют углеводы двумя основными способами:

• ферментативно;
• окислительно.

Это свойство может использоваться для дифференциации отдельных бактерий.

В среде Хью—Лейфсона HiVeg® животный пептон полностью заменён пептонами растительного происхождения, что позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE). Высокая концентрация углеводов и низкая концентрация пептона HiVeg® уменьшают вероятность использования пептона аэробным организмом с образованием щелочной реакции, которая могла бы нейтрализовать слабую кислотность, образуемую окислительным организмом.

Дикалий фосфат способствует ферментации и выполняет функцию буфера, регулирующего pH. Концентрация агара позволяет определить подвижность микроорганизмов и способствует распределению по пробирке кислоты, образующейся на поверхности среды.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Приготовьте суспензию из 19,35 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки для постановки параллельных вариантов ферментации в аэробных и анаэробных условиях.
4. Стерилизуйте пробирки автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов; ориентировочное давление составляет ≈0,10 МПа.
5. Охладите среду в пробирках, установленных вертикально.
6. Инокулируйте пробирки для аэробной и анаэробной ферментации.
7. Поверхность агара в одной пробирке из пары покройте слоем стерильного жидкого парафинового масла толщиной около 25 мм.
8. Инкубируйте пробирки при 37 °C.

Жидкий парафин, используемый для покрытия пробирки, необходимо стерилизовать сухим способом при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением для этой цели недостаточна.

Интерпретация результатов

• Окислительные микроорганизмы образуют кислоту в незапечатанной пробирке; рост при этом незначительный или отсутствует.
• В запечатанной пробирке окислительные микроорганизмы не образуют кислоту.
• Ферментативные микроорганизмы образуют кислоту как в запечатанной, так и в незапечатанной пробирке.
• Образование кислоты выявляют по изменению окраски среды с зеленовато-синей на жёлтую по всему объёму среды.
• Помутнение среды за пределами линии укола указывает на положительную реакцию подвижности.
• Рост только вдоль линии укола указывает на отрицательную реакцию подвижности.

Контроль качества

Внешний вид: светло-жёлтый или голубовато-зелёный однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование: полужидкая среда, сопоставимая с 0,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде столбика образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелено-синего цвета.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 1,94 % мас./об. при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее организм был известен как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV826-500G
• Назначение изделия: среда
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH по контролю качества: 6,60–7,00

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости, а приготовленную среду — при 15–25 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.

Храните среду в сухом проветриваем