HiMedia MV826-500G HiVeg среда Хью-Лейфсона

Сухая питательная среда HiMedia MV826-500G HiVeg среда Хью-Лейфсона для определения аэробного и анаэробного расщепления глюкозы. Применяется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции; содержит растительные пептоны HiVeg® для исключения рисков BSE/TSE.

Принцип измерения

Среда Хью-Лейфсона предназначена для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий по типу метаболизма углеводов: ферментативному (брожение) или окислительному.

В составе используется высокая концентрация углеводов и низкая концентрация растительного пептона HiVeg®, чтобы предотвратить использование пептона аэробными организмами, которое могло бы привести к защелачиванию среды и нейтрализовать слабую кислотность, создаваемую окислительными организмами. Дикалийфосфат выполняет роль pH-контролирующего буфера и стимулирует ферментацию. Низкое содержание агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению кислоты по всей трубке.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды: 19,35 г порошка суспендируют в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. Нагревают до кипения для полного растворения.
2. Розлив: Среду разливают по пробиркам в двух экземплярах (для определения аэробной и анаэробной ферментации).
3. Стерилизация: Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут. Охлаждают пробирки в вертикальном положении.
4. Инокуляция:
   • В одну из двух параллельных пробирок вносят посевной материал.
   • Поверхность агара в одной из пробирок покрывают слоем стерильного парафинового масла толщиной около 25 мм.
   • Инкубируют при температуре 37 °C.
5. Интерпретация результатов:
   • Окислительные организмы: вырабатывают кислоту в незапечатанной пробирке (при слабом росте или его отсутствии), но не образуют кислоты в запечатанной пробирке.
   • Ферментативные организмы: вырабатывают кислоту в обеих пробирках (запечатанной и незапечатанной).
   • Индикатор: образование кислоты сопровождается изменением цвета среды с зеленовато-синего на жёлтый по всему объёму.

Технические характеристики

Основные параметры

• Назначение: определение аэробного и анаэробного расщепления глюкозы
• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до сине-зелёного цвета
• Цвет готовой среды: зеленовато-синий, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2 (диапазон 6,60–7,00)
• Желирование: полутвердый гель, сопоставим с 0,2 % агаром

Состав (г/л)

Дополнительные спецификации

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: от +10 до +30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре +15…+25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Подготовка парафина: жидкий парафин для запечатывания пробирок должен проходить сухую стерилизацию при 160–170 °C в течение 2 часов. Влажная стерилизация под давлением для этой цели недостаточна.

Ограничения и предостережения

• Влажная стерилизация под высоким давлением недостаточно эффективна для подготовки парафинового слоя.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.