HiMedia MV826-100G Hugh Leifson HiVeg Medium → HiVeg среда Хью-Лейфсона

Питательная среда HiVeg среда Хью-Лейфсона (HiMedia MV826-100G) на растительной основе для определения аэробного и анаэробного расщепления глюкозы. Применяется для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий по типу метаболизма углеводов; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения

Среда основана на методе Хью и Лейфсона и используется для таксономического разделения бактерий по способности к окислению или ферментации углеводов. Микроорганизмы могут утилизировать углеводы двумя путями:

1. Окисление (аэробный путь): кислота вырабатывается только в открытой пробирке (при наличии доступа кислорода), рост может быть слабым.
2. Ферментация (анаэробный путь): кислота вырабатывается как в открытой, так и в закрытой (герметизированной) пробирке.

Среда содержит высокую концентрацию углеводов и низкую концентрацию растительного пептона HiVeg®, что предотвращает использование пептона аэробными организмами и последующее защелачивание среды, которое могло бы нейтрализовать слабую кислотность, создаваемую при окислении. Гидрофосфат калия выступает в роли pH-буфера и стимулирует ферментацию. Низкая концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению кислоты по всей высоте пробирки.

Область применения

Среда рекомендуется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 19,35 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду в пробирки в двух экземплярах (для определения аэробной и анаэробной ферментации).
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Процедура и интерпретация

1. Внесите исследуемый образец в обе пробирки.
2. Поверхность агара в одной из пробирок залейте слоем стерильного жидкого парафина толщиной около 25 мм.
3. Инкубируйте при температуре 37 °C.
4. Оценка результатов:
   • Окислители: вырабатывают кислоту в открытой пробирке (при этом рост может быть незначительным); в закрытой пробирке кислота не образуется.
   • Ферментаторы: вырабатывают кислоту в обеих пробирках (и в открытой, и в закрытой).
   • Индикатор: образование кислоты сопровождается изменением цвета среды с сине-зелёного на жёлтый по всему объему.

Важное требование: Жидкий парафин должен проходить сухую стерилизацию при 160–170 °C в течение 2 часов. Влажная стерилизация под давлением для данной цели недостаточна.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Культуральные свойства

Характеристики наблюдались после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Хранение и ограничения

• Хранение: порошок хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере; готовую среду — при 15–25 °C.
• Ограничения: результаты должны быть подтверждены дополнительными биохимическими и серологическими тестами.
• Меры предосторожности: использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, очки). Соблюдать правила работы с инфекционными материалами.