Питательная микробиологическая среда HiMedia MV826-100G Hugh Leifson HiVeg Medium → HiVeg среда Хью-Лейфсона предназначена для выявления аэробного и анаэробного расщепления глюкозы; форма выпуска — порошок массой 100 г. Среда применяется для анализа пищевых и молочных образцов, а результаты требуют подтверждения дополнительными биохимическими и серологическими тестами.

Назначение

Среда Хью-Лейфсона HiVeg рекомендована для выявления аэробного и анаэробного расщепления глюкозы микроорганизмами.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среда Хью-Лейфсона разработана Hugh и Leifson для оценки таксономической значимости ферментативного и окислительного метаболизма углеводов у грамотрицательных кишечных бактерий.

Микроорганизмы используют углеводы двумя основными способами:

• ферментация;
• окисление.

Данное свойство может применяться для дифференциации отдельных видов бактерий. В среде Hugh Leifson HiVeg пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Высокая концентрация углеводов и низкая концентрация пептона HiVeg предотвращают ситуацию, при которой аэробный организм использует пептон и создаёт щелочную реакцию, нейтрализующую слабую кислотность, образованную окислительным организмом.

Двузамещённый фосфат калия способствует ферментации и действует как буфер, регулирующий pH. Концентрация агара обеспечивает возможность определения подвижности микроорганизмов и способствует распределению по пробирке кислоты, образующейся на поверхности среды.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 19,35 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки в двух экземплярах для проведения аэробной и анаэробной ферментации.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; ориентировочное давление — около 0,103 МПа (15 фунтов на кв. дюйм).
5. Охладите среду в пробирках, установленных вертикально.

Методика работы с образцами

1. Инокулируйте пробирки для аэробной и анаэробной ферментации.
2. Поверхность агара в одной пробирке из пары покройте слоем стерильного жидкого парафинового масла толщиной около 25 мм.
3. Инкубируйте пробирки при 37 °C.
4. Для приготовления жидкого парафинового слоя используйте сухую стерилизацию при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением для этой цели недостаточна.

Интерпретация результатов

• Окислительные организмы образуют кислоту в незапечатанной пробирке; рост при этом слабый или отсутствует, а в запечатанной пробирке образование кислоты не происходит.
• Ферментативные организмы образуют кислоту как в запечатанной, так и в незапечатанной пробирке.
• Образование кислоты определяется по изменению окраски среды с зеленовато-синей на жёлтую по всему объёму среды.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до голубовато-зелёного цвета.
• Гелеобразование: полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде столбика образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёно-синего цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 1,94 % масс./об. при 25 °C; pH — 6,8 ± 0,2.
• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее классифицировался как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Храните сухой продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 15–25 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Меры безопасности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При