HiMedia MV825-500G Ферментационная HiVeg среда для Neisseriae

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV825-500G Ферментационная HiVeg среда для Neisseriae — сухая порошкообразная среда с конечным pH 7,5 ± 0,1. Применяется для изучения окисления углеводов требовательными микроорганизмами рода Neisseria в образцах пищевых продуктов; для подтверждения вида необходимы окраска по Граму и оксидазный тест.

Назначение

Среда рекомендована для изучения ферментационной реакции требовательных микроорганизмов, включая виды Neisseria. Тип исследуемого образца — пищевые продукты.

Формула модифицирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. В составе используются растительные пептоны HiVeg® вместо пептонов животного происхождения; среда не содержит компонентов животного происхождения и не связана с рисками BSE/TSE.

Состав

Состав на 1 л среды:

Принцип действия и интерпретация результатов

Виды Neisseria относятся к окислительным микроорганизмам: они образуют кислоту из углеводов в результате окисления. Такие микроорганизмы образуют из углеводов меньше кислоты, чем ферментативные организмы, а также продуцируют аммиак из пептонов. Аммиак может нейтрализовать образующуюся кислоту, поэтому образование кислоты определяют в среде с низким соотношением белка и углеводов и чувствительным индикатором, таким как феноловый красный.

Ферментационная среда для Neisseriae предназначена для изучения ферментационных реакций требовательных микроорганизмов, включая Neisseria. Среда представляет собой модификацию среды, первоначально разработанной Vera.

Виды Neisseria окисляют добавленные углеводы с образованием кислот. Образовавшиеся кислоты изменяют цвет индикатора pH — феноловый красный переходит от оранжевого к жёлтому. Одновременно микроорганизм расщепляет источник пептона с образованием аммиака. Возникающая щёлочность изменяет цвет фенолового красного на розовый. Если кислотность, образованная при метаболизме углеводов, выше щёлочности, образованной при расщеплении пептона, среда остаётся жёлтой.

Функции компонентов:

• Гидролизат HiVeg®: источник необходимых азотсодержащих питательных веществ.
• L-цистин: источник аминокислот и восстановитель; может удалять, или связывать, молекулярный кислород, предотвращая накопление пероксидов, токсичных для некоторых микроорганизмов.
• Агар: в небольшой концентрации снижает конвекционные потоки в среде и способствует сохранению анаэробных условий в глубине пробирок.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотическое равновесие среды.
• Феноловый красный: индикатор pH, который приобретает жёлтый цвет при кислой реакции.

Инокулированные пробирки следует осматривать через каждые 4 ч. Развитие жёлтого окрашивания по всему объёму среды указывает на окисление углевода с образованием кислот. Розовое окрашивание указывает на отсутствие окисления углеводов и расщепление только пептонов.

Виды Neisseria обычно образуют кислоту из углеводов вблизи зоны инокуляции — области посева уколом. При наличии сопутствующих загрязняющих микроорганизмов вся среда может приобрести жёлтую окраску.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 29,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду и стерилизуйте автоклавированием при 118 °C в течение 15 мин. Давление не должно превышать 12 фунтов (≈0,083 МПа).
4. Охладите среду примерно до 40–45 °C.
5. Добавьте растворы сахаров, стерилизованные мембранной фильтрацией, до конечной концентрации 1 %.
6. Для получения конечной концентрации 1 % добавьте 5 мл 20%-ного раствора сахара на каждые 100 мл среды.

Требования к образцам и обращение

Для образцов пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим указаниям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Виды Neisseria необходимо дополнительно подтверждать окраской по Граму и оксидазным тестом.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков образуется соломенно-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 2,95%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,5 ± 0,1.

Диапазон pH

pH: 7,40–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с добавлением 1 % декстрозы.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухого препарата: при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить препарат в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Условия хранения: сухое проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Утилизация

Использованные или непригодные к применению препараты необходимо утилизировать безопасным способом с помощью автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым методическим указаниям.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Технические характеристики

Отличие методики

В отличие от сред с пептонами животного происхождения, MV825-500G содержит растительный гидролизат HiVeg®; выявление окисления углеводов основано на изменении окраски фенолового крас