HiMedia MV483-500G HiVeg среда для теста на глюконат

Сухая питательная среда HiMedia MV483-500G HiVeg для теста на глюконат. Применяется для определения способности бактерий окислять глюконаты до альфа-кетоглюконата; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда HiVeg для теста на глюконат представляет собой модификацию стандартной среды для теста на глюконат, в которой пептический перевариваемый животный белок заменён на HiVeg-пептон. Благодаря этому продукт свободен от риска заражения ТСЭ/БГЭ (трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями).

В составе среды HiVeg-пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота, витаминов и других необходимых питательных веществ. Гидрофосфат калия обеспечивает буферизацию среды. Глюконат калия является единственным доступным источником углерода для метаболизма исследуемого микроорганизма.

Тест основан на переходе глюконата (невосстанавливающее соединение) в альфа-кетоглюконат (восстанавливающее соединение). При взаимодействии с подходящим реагентом (например, реагентом Бенедикта) альфа-кетоглюконат восстанавливает сульфат меди (синий цвет) до нерастворимого оксида меди(I), который выпадает в осадок. Цвет осадка (от жёлтого до оранжево-красного) зависит от количества накопившегося восстанавливающего вещества.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворите 43,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по флаконам с завинчивающимися крышками по 10 мл.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,07 МПа) в течение 15 минут.

Процедура теста на глюконат

1. Культивируйте исследуемый организм в течение 48 часов.
2. Перенесите аликвоты по 1 мл культуры в чистые стерильные пробирки.
3. Добавьте 1 мл качественного реагента Бенедикта (R003).
4. Тщательно перемешайте и поместите пробирки в кипящую водяную баню (100 °C) на 10 минут.

Интерпретация результатов

• Положительная реакция (+): образование осадка от светло-зелёного до тёмно-оранжевого цвета. Это указывает на окисление глюконата. Чем интенсивнее оранжевый или оранжево-красный цвет, тем больше в среде накопилось альфа-кетоглюконата.
• Отрицательная реакция (−): раствор остаётся синим или сине-зелёным. Это означает, что восстанавливающие вещества не образовались, и глюконат калия не метаболизировался.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Спецификации

• Концентрация при приготовлении: 43,5 г/л
• Общий объём готовой среды из упаковки 500 г: 11,49 л
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут
• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C
• Внешний вид порошка: гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета, возможен слегка зеленоватый оттенок
• Цвет и прозрачность раствора: светло-соломенный, прозрачный раствор без осадка

Дополнительные параметры

Контроль качества (Культуральные характеристики)

Характеристики определяются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ключ:

• + = положительная реакция, осадок от светло-зелёного до тёмно-оранжевого.
• − = отрицательная реакция, цвет не изменился или остался синим.

Сравнительный контекст

В отличие от стандартных сред на основе пептического перевариваемого животного белка (например, модель M483), среда MV483 использует растительный HiVeg-пептон, что исключает риск контаминации прионами (TSE/BSE).