HiMedia MV483-500G HiVeg среда для теста на глюконат

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV483-500G HiVeg для теста на глюконат с конечным pH 7,0 ± 0,2. Используется для определения способности бактерий окислять глюконаты до альфа-кетоглюконата после инкубации исследуемой культуры в течение 48 ч.

Назначение

Среда применяется для проверки способности микроорганизмов окислять глюконаты до альфа-кетоглюконата.

Принцип анализа

Среда представляет собой модификацию среды для теста на глюконат, в которой пептический перевар тканей животного происхождения заменён пептоном HiVeg®. Пептон HiVeg®, дрожжевой экстракт, дикалий гидрофосфат и глюконат калия выполняют следующие функции:

• дрожжевой экстракт служит источником азота, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• дикалий гидрофосфат обеспечивает буферную ёмкость среды;
• глюконат калия является доступным единственным источником углерода для исследуемого микроорганизма и субстратом для определения метаболизма глюконата.

Среда предназначена для определения способности микроорганизма окислять глюконаты до альфа-кетоглюконата, который накапливается в среде. Pseudomonas aeruginosa после 48 ч инкубации способна накапливать не менее 50 % кетоглюконата.

Основа теста — превращение глюконата, являющегося невосстанавливающим соединением, в альфа-кетоглюконат, который обладает восстанавливающими свойствами. При добавлении реактива Бенедикта образовавшийся альфа-кетоглюконат восстанавливает сульфат меди с образованием нерастворимого закисного оксида меди, выпадающего в осадок. Цвет осадка изменяется от жёлтого до оранжевого и оранжево-красного в зависимости от количества накопившегося восстанавливающего вещества: чем больше альфа-кетоглюконата образуется в среде, тем более выраженным становится оранжевый или оранжево-красный цвет.

Окрашивание от слабо-зелёного до насыщенно-оранжевого указывает на окисление. Если после добавления раствора Бенедикта среда остаётся синей или сине-зелёной, реакцию считают отрицательной: восстанавливающее вещество отсутствует либо не образовалось, а глюконат калия не метаболизируется.

Профиль продукта

Состав

Состав на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 43,5 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Распределите приготовленную среду по 10 мл в бутылки с завинчивающимися крышками.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на кв. дюйм соответствует примерно 0,103 МПа.

Методика проведения теста на глюконат

1. Культивируйте исследуемый микроорганизм в течение 48 ч для определения способности к окислению глюконата.
2. Перенесите аликвоты объёмом 1 мл в чистые стерильные пробирки.
3. Добавьте в каждую пробирку 1 мл качественного реактива Бенедикта R003.
4. Тщательно перемешайте содержимое.
5. Поместите пробирки на 10 мин в кипящую водяную баню при 100 °C.
6. Оцените цвет образовавшегося осадка и изменение окраски среды.

Технические характеристики

• Назначение: среда для теста на глюконат
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Код продукта: MV483
• Артикул: MV483-500G
• Масса: 500 г
• Расход при восстановлении: 43,5 г/л
• Объём среды после приготовления из упаковки 500 г: 11,49 л
• pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Добавка: отсутствует
• Стерилизация: 121 °C, 15 мин
• Условия хранения сухой среды: ниже 30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Тип упаковки: ПЭНД (HDPE)

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет порошка — от кремового до жёлтого; допускается слегка зеленоватый оттенок. Порошок однородный, сыпучий, без комков.

Цвет и прозрачность раствора

Раствор светло-соломенного цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 4,35 % масс./об. при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Обозначения результатов:

• + — положительная реакция, осадок от слабо-зелёного до насыщенно-оранжевого цвета;
• − — отрицательная реакция, отсутствие изменения цвета или сохранение синей окраски.

Сравнительное техническое отличие

В среде MV483 пептический перевар тканей животного происхождения заменён пептоном HiVeg®, поэтому продукт относится к средам растительного происхождения и не содержит компонентов животного происхождения.

Комплект поставки

• Сухая питательная среда HiMedia MV483-500G, 500 г.

Совместимость с реагентами

• Качественный реактив Бенедикта R003 — используется для выявления образовавшегося альфа-кетоглюконата.