HiMedia MV395-500G OF базальная HiVeg среда

Базальная среда HiVeg MV395-500G OF производства HiMedia для дифференциации грамотрицательных бактерий на основе окислительного и ферментативного метаболизма углеводов. Применяется для таксономических исследований семейства Enterobacteriaceae; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда разработана по методу Хью и Лейфсона (Hugh and Leifson) для изучения метаболизма углеводов грамотрицательными бактериями. Гидролизат HiVeg® обеспечивает необходимые углерод, азот и витамины для роста микроорганизмов. Использование растительных пептонов вместо животных делает среду безопасной (отсутствие рисков BSE/TSE).

Фосфатный буфер стабилизирует pH, а низкая концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению вырабатываемой кислоты по поверхности. Бромтимоловый синий служит pH-индикатором: при расщеплении углеводов до кислоты цвет среды меняется с зеленого на желтый.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворите 9,38 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по 100 мл и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.

Добавление углеводов

Для анализа подготавливают разные варианты среды, добавляя в 100 мл стерильной базальной основы 10 мл стерильного 10 % раствора соответствующего углевода:

• декстрозы;
• лактозы;
• сахарозы.

Процедура и интерпретация

1. Смешайте среду с углеводом и асептически разлейте по 5 мл в стерильные пробирки (в двух экземплярах для каждого углевода).
2. Засейте среду методом укола (stabbing).
3. Одну пробирку из каждой пары залейте 2 мл стерильного минерального масла для исключения доступа кислорода (анаэробные условия), вторую оставьте открытой (аэробные условия).
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–48 часов или дольше. Результаты считывают через 48 часов.

Интерпретация результатов:

• Ферментативный тип: кислая реакция (желтый цвет) наблюдается как в открытой, так и в закрытой (маслом) пробирке.
• Окислительный тип: кислая реакция в открытой пробирке; в закрытой — слабый рост без изменения цвета.
• Неокислительные/неферментативные организмы: отсутствие изменений в закрытой пробирке и щелочная реакция в открытой.

Подвижность определяется по диффузной зоне распространения от линии инокуляции; неподвижные организмы растут строго вдоль линии посева.

Технические характеристики

Основные параметры

• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до зеленовато-желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленого цвета
• Реакция (0,94 % водный раствор при 25 °C): pH 6,8 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Консистенция: полужидкая (сопоставима с 0,2 % агаровым гелем)

Состав, г/л

Дополнительные спецификации

Область применения

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами из клинических и неклинических образцов, включая пищевые и молочные продукты.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и дополнения

• Среда зависит от pH, поэтому необходимо контролировать этот параметр.
• Для роста некоторых требовательных организмов может потребоваться добавка 2 % сыворотки или 0,1 % экстракта дрожжей.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования In Vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Контаминированные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или сожжены в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.