HiMedia MV395-100G OF базальная HiVeg среда

Базальная среда HiVeg MV395-100G OF производства HiMedia для дифференциации грамотрицательных бактерий на основе окислительного и ферментативного метаболизма углеводов. Применяется для таксономических исследований семейства Enterobacteriaceae; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Среда разработана по методу Хью и Лейфсона (Hugh and Leifson) для изучения метаболизма углеводов грамотрицательными бактериями. Гидролизат HiVeg® обеспечивает необходимые углерод, азот и витамины для роста микроорганизмов. Использование растительных пептонов вместо животных делает среду безопасной (отсутствие рисков BSE/TSE).

Фосфатный буфер стабилизирует pH, а низкая концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и обеспечивает равномерное распределение вырабатываемой кислоты по поверхности. В качестве индикатора pH используется бромтимоловый синий.

Интерпретация результатов

Определение основано на изменении цвета индикатора бромтимолового синего с зеленого на желтый при образовании кислоты:

• Ферментативный метаболизм: кислотная реакция (пожелтение) наблюдается как в открытой пробирке, так и в пробирке, закрытой минеральным маслом.
• Окислительный метаболизм: кислотная реакция наблюдается только в открытой пробирке; в закрытой пробирке наблюдается слабый рост без изменения цвета.
• Отсутствие метаболизма: в закрытой пробирке изменений нет, в открытой — щелочная реакция.

Методика проведения анализа

1. Приготовление базовой среды:
   • Суспендируйте 9,38 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • Нагрейте до кипения для полного растворения.
   • Разлейте по 100 мл и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
2. Добавление углеводов:
   • В первую порцию (100 мл) стерильной базовой среды асептически добавьте 10 мл стерильного 10 % раствора декстрозы.
   • Во вторую порцию (100 мл) добавьте 10 мл стерильного 10 % раствора лактозы.
   • В третью порцию (100 мл) добавьте 10 мл стерильного 10 % раствора сахарозы.
3. Посев:
   • Перемешайте и асептически разлейте по 5 мл в стерильные пробирки (в двух экземплярах для каждого углевода: для аэробного и анаэробного тестов).
   • Произведите инокуляцию методом укола.
4. Инкубация:
   • Одну пробирку из каждой пары залейте 2 мл стерильного минерального масла для исключения доступа кислорода, вторую оставьте открытой.
   • Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 18–48 часов или дольше.
5. Считывание результатов:
   • Оценка проводится через 48 часов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до зеленовато-желтого цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставим с 0,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленого цвета.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Область применения

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами из клинических и неклинических образцов. Применяется в микробиологических лабораториях для идентификации бактерий.

Ограничения и дополнения

• Поскольку среда pH-зависима, необходимо контролировать уровень pH.
• Для роста некоторых требовательных организмов среду можно дополнить 2 % сывороткой или 0,1 % экстрактом дрожжей.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Использование: только для профессионального применения in vitro.
• Требования к безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами.