HiMedia MV379-500G Морская окислительно-ферментационная HiVeg среда

Питательная среда HiMedia MV379-500G Морская окислительно-ферментационная HiVeg среда производства HiMedia — сухая порошкообразная среда для дифференциации морских бактерий. Среда предназначена для определения окислительного и ферментативного метаболизма углеводов у изолированных микроорганизмов из проб воды; хранится при 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение

Среда рекомендуется для дифференциации морских бактерий по ферментативному и окислительному метаболизму углеводов.

Тип образца: изолированные микроорганизмы из пробы воды.

Состав

Расчётный состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип дифференциации

Некоторые микроорганизмы метаболизируют глюкозу окислительным путём, а другие ферментируют глюкозу в условиях, когда акцептором водорода не является кислород. Различить такие микроорганизмы можно с помощью окислительно-ферментационного теста, также известного как тест «оксиферментации».

Морская окислительно-ферментационная среда HiVeg представляет собой модификацию среды по формуле, первоначально разработанной Лейфсоном, для дифференциации морских бактерий по окислительному и ферментативному метаболизму углеводов.

Высокая концентрация солей в морской воде обеспечивает условия для существования галофильных, или солелюбивых, микроорганизмов. Кроме того, морские микроорганизмы должны быть психрофильными, поскольку ниже поверхностного слоя воды температура очень низкая. Микроорганизмы, обитающие на дне, также должны выдерживать высокое давление, поэтому относятся к барофильным, или устойчивым к давлению, организмам.

Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми питательными веществами, включая аминокислоты и витамины. Минеральный состав среды эквивалентен половине минерального состава морской воды. Содержащиеся в среде соли характерны для морской воды, обеспечивают пригодность среды для культивирования морских бактерий и одновременно выполняют буферную функцию. Феноловый красный используется как индикатор pH.

Среда HiVeg приготовлена с использованием растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 22,14 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление, указанное производителем, — 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильный раствор декстрозы или другого выбранного углевода до конечной концентрации 1 %.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки для формирования столбиков.

Методика проведения окислительно-ферментационного теста

1. Для каждой исследуемой культуры инокулируйте две пробирки со средой, содержащей углевод.
2. Одну пробирку для каждой культуры покройте стерильным расплавленным вазелином, сформировав слой высотой приблизительно 25,4 мм (1″).
3. Оцените изменение окраски среды:
   • морские бактерии, ферментирующие углеводы, изменяют окраску среды с красной на жёлтую в обеих пробирках — закрытой и открытой;
   • морские бактерии, окисляющие углеводы, изменяют окраску с красной на жёлтую только в открытой пробирке;
   • морские бактерии, не проявляющие окислительной или ферментативной активности, не изменяют окраску в закрытой пробирке, а в открытой пробирке вызывают щелочную реакцию с изменением окраски от красной до тёмно-розовой.
4. Газообразование определяют по расщеплению или смещению агара либо по образованию небольших пузырьков.
5. У подвижных микроорганизмов формируется диффузная зона роста, распространяющаяся от линии посева.
6. Неподвижные микроорганизмы растут вдоль линии посева.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: MV379-500G
• Назначение изделия: питательная среда
• Масса: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: HiVeg™
• Материал упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Конечный pH при 25 °C: 8,0 ± 0,2
• pH 2,2 % (м/об.) водного раствора при 25 °C: 8,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,80–8,20
• Растительное происхождение пептонов: да, продукт без компонентов животного происхождения
• Консистенция приготовленной среды: полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,3 % агарового геля

Контроль качества

Внешний вид порошка

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-фиолетового цвета.

Гелеобразование

Полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,3 % агарового геля.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель розового цвета.

Реакция среды

Реакцию определяют для 2,2 % (м/об.) водного раствора при 25 °C.

• pH: 8,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,80–8,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и локальными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия эксплуатации, хранения и срок годности

• Храните сухую среду при