HiMedia MV378-500G MIO HiVeg среда (подвижность-индол-орнитин)

Питательная среда HiMedia MV378-500G MIO HiVeg среда (подвижность-индол-орнитин) на растительной основе предназначена для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae по подвижности, продукции индола и активности орнитиндекарбоксилазы. Среда поставляется в виде порошка массой 500 г, а приготовленную среду хранят при 2–8 °C.

Назначение

Среда MIO HiVeg® применяется для идентификации Enterobacteriaceae по трём признакам:

• подвижность микроорганизмов;
• продукция индола;
• активность орнитиндекарбоксилазы.

Методика предусматривает определение всех трёх признаков в одной пробирке с посевом уколом.

Профиль продукта

Среда приготовлена с использованием растительных пептонов, не содержащих рисков BSE/TSE.

Состав

Содержание компонентов приведено в граммах на литр:

Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки по 5 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление составляет 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Восстановление и хранение

Принцип действия и интерпретация

MIO HiVeg® является модификацией среды MIO, разработанной Ederer и Clark, а также Oberhofer и Hajkowski для выявления подвижности, продукции индола и декарбоксилирования орнитина в одной пробирке с культурой.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• гидролизат HiVeg® и пептон HiVeg® обеспечивают аминокислотами и другими азотистыми веществами;
• дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B;
• декстроза является ферментируемым углеводом;
• бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH;
• индол образуется из триптофана, присутствующего в гидролизате HiVeg®.

Культуры инокулируют уколом.

Определение подвижности

Реакцию на подвижность считывают до проведения теста на продукцию индола.

• Подвижные микроорганизмы образуют диффузный рост или помутнение, распространяющееся от линии посева.
• Неподвижные микроорганизмы растут вдоль линии укола.

Определение декарбоксилирования орнитина

Реакцию на декарбоксилирование орнитина также считывают до тестирования продукции индола.

При ферментации декстрозы микроорганизмы образуют кислоту, вследствие чего бромкрезоловый пурпурный изменяет окраску с фиолетовой на жёлтую.

Микроорганизмы, обладающие орнитиндекарбоксилазой, декарбоксилируют орнитин с образованием путресцина. Это повышает pH и создаёт щелочную реакцию, которая проявляется изменением окраски всей среды с жёлтой на фиолетовую.

Отрицательная реакция на декарбоксилазу характеризуется:

• жёлтой окраской среды;
• либо жёлтой окраской с фиолетовой полосой в верхней части среды.

Определение продукции индола

Индол, образовавшийся из триптофана, реагирует с альдегидом, содержащимся в реактиве Ковача, с образованием красного комплекса.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок светло-жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Полутвёрдая среда, сопоставимая с 0,2-процентным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

В пробирках в виде столбика образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель фиолетового цвета.

Реакция

pH 3,1-процентного водного раствора при 25 °C: 6,5 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Обозначения:

• + — положительная реакция;
• − — отрицательная реакция;
• * — подвижность Proteus mirabilis зависит от температуры: наиболее выражена при 20–22 °C и практически отсутствует при 35–37 °C;
• ** — декарбоксилирование.

Контрольные культуры

Для MIO HiVeg® среды MV378 используют следующие варианты:

1. Контроль.
2. Escherichia coli.
3. Klebsiella pneumoniae.
4. Proteus mirabilis.

Технические характеристики

Отличие от среды на животной основе

Вариант MV378 содержит пептон и гидролизат HiVeg® растительного происхождения, тогда как соответствующий вариант M378 содержит пептический перевар тканей животного происхождения и ферментативный гидролизат казеина.

Условия хранения

Сухую среду хранят при температуре ниже 30 °C. После приготовления среду хранят при 2–8 °C.