HiMedia MV364-500G Триптон-нитратная HiVeg среда

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV364-500G Триптон-нитратная HiVeg среда предназначена для идентификации микроорганизмов по образованию индола и восстановлению нитратов. Среда применяется для анализа пищевых, молочных и водных образцов, при этом для исследования используют изолированные микроорганизмы возрастом 18–24 ч.

Назначение

Среда рекомендована для идентификации микроорганизмов по двум признакам:

• образованию индола;
• восстановлению нитратов.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Индольно-нитратная среда, также называемая триптон-нитратной средой, благодаря питательному составу поддерживает рост аэробов, микроаэрофилов, факультативных и облигатных анаэробов.

Среда предназначена для одновременного выявления образования индола и восстановления нитратов у широкого спектра микроорганизмов.

Среда ISP HiVeg® № 6 — пептонно-дрожжевой железный агар HiVeg® — приготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски BSE/TSE, связанные с компонентами животного происхождения.

Гидролизат HiVeg® содержит триптофан. Некоторые микроорганизмы воздействуют на триптофан с образованием индола. Нитрат калия служит субстратом для определения восстановления нитратов микроорганизмами.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 25,0 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Методика исследования образцов

Дублированные пробирки с индольно-нитратной средой можно инокулировать и исследовать на наличие нитратов или индола после инкубации в течение заданного времени.

Определение восстановления нитратов

1. Добавьте в пробирку по 0,5 мл сульфаниловой кислоты (R015) и α-нафтиламина (R009).
2. Розовое окрашивание указывает на восстановление нитратов.
3. Окрашивание развивается вследствие присутствия нитрита, образовавшегося при восстановлении нитрата.
4. Если нитрат восстанавливается далее до аммиака, окрашивание не развивается.
5. Добавьте в пробирку щепотку цинковой пыли.
6. Появление розового окрашивания после добавления цинковой пыли указывает на то, что нитрат не был восстановлен.

Определение образования индола

1. Добавьте реактив Ковача (R008) или реактив Эрлиха (R005).
2. Осторожно перемешайте содержимое.
3. Образование интенсивно-красного окрашивания в слое реактива указывает на положительный результат теста на индол.

Индольно-нитратная среда не рекомендуется для определения индола у колиформных и других энтеробактерий, поскольку они восстанавливают нитрат до нитрита, что препятствует выявлению индола.

Индольно-нитритную среду не следует использовать для определения образования индола представителями семейства Enterobacteriaceae.

Перед использованием среду в пробирках необходимо кипятить в течение 2 мин, затем охладить без перемешивания.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Полутвёрдая среда, сопоставимая с 0,1%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбика образуется светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакцию определяют для 2,5 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,2 ±0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоподготовка и ограничения

• Для анализа необходимо использовать изолированные микроорганизмы возрастом 18–24 ч.
• Дублированные пробирки среды могут использоваться для параллельного определения восстановления нитратов и образования индола.
• Индольно-нитратная среда не рекомендуется для определения индола у колиформных и других энтеробактерий из-за восстановления нитрата до нитрита, препятствующего выявлению индола.
• Индольно-нитритную среду не следует использовать для определения образования индола представителями семейства Enterobacteriaceae.
• Перед использованием пробирочную среду необходимо кипятить 2 мин и охлаждать без перемешивания.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Храните продукт в плотно закрытой ёмкости.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Эффективность продукта обеспечивается при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендован