HiMedia MV364-500G Триптон-нитратная HiVeg среда

Триптон-нитратная HiVeg среда HiMedia MV364-500G для идентификации микроорганизмов по способности восстанавливать нитраты и вырабатывать индол. Применяется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда благодаря своему питательному составу поддерживает рост аэробов, микроаэрофилов, а также факультативных и облигатных анаэробов. Она предназначена для одновременного определения продукции индола и восстановления нитратов широким спектром микроорганизмов.

В составе используется гидролизат HiVeg®, который содержит триптофан; определенные микроорганизмы воздействуют на него, что приводит к образованию индола. Нитрат калия служит субстратом для определения способности микроорганизмов восстанавливать нитраты. Использование растительных пептонов вместо животных делает среду безопасной (отсутствие рисков BSE/TSE).

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 25,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Перед использованием среду в пробирках следует прокипятить в течение 2 минут и охладить без перемешивания.

Процедура и интерпретация результатов

Для анализа используют дубликатные пробирки, которые инокулируют и инкубируют в течение определенного времени.

Тест на восстановление нитратов:

1. В пробу добавьте по 0,5 мл сульфаниловой кислоты (R015) и $\alpha$-нафтиламина (R009).
2. Появление розового окрашивания указывает на восстановление нитрата (из-за образования нитритов).
3. Если окрашивание отсутствует, добавьте щепотку цинковой пыли. Появление розового цвета после добавления цинка означает, что нитраты не были восстановлены. Если цвет не появился, значит нитраты были восстановлены до аммиака.

Тест на продукцию индола:

1. Добавьте реагент Ковакса (R008) или реагент Эрлиха (R005).
2. После осторожного перемешивания образование ярко-красного цвета в слое реагента свидетельствует о положительном результате.

Ограничения:

• Среда не рекомендуется для определения индола у колиформных и других энтерических бактерий, так как они восстанавливают нитраты до нитритов, что препятствует обнаружению индола.
• Для анализа должны использоваться изолированные микроорганизмы с возрастом культуры 18–24 часа.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставим с 0,1% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках формирует столбик).
• Реакция: pH 7,2 $\pm$ 0,2 для 2,5% (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному уничтожению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.